Реферат: Методика и техника переливания крови

<span Monotype Corsiva"">Методикаи техника переливания крови и ее компонентов

<span Monotype Corsiva"">

<span Monotype Corsiva"">         Переливанием (трансфузией) компонентов крови (эритроцитсодержащиепереносчики газов крови, тромбоцитсодержащие иплазменные корректоры гемостаза и фибринолиза, лейкоцитсодержащие и плазменные средства коррекциииммунитета) является лечебный метод, заключающийся во введении в кровеносноерусло больного (реципиента) указанных компонентов, заготовленных от донора илисамого реципиента (аутодонорство), а также крови и еекомпонентов, излившейся в полости тела при травмах и операциях (реинфузия). 

<span Monotype Corsiva"">         Операция переливания компонентов крови сопровождается для реципиентапоследствиями, как положительными (увеличение числа циркулирующих эритроцитов,повышение уровня гемоглобина при переливании эритроцитов, купирование острогодиссеминированного внутрисосудистого свертывания при переливании плазмысвежезамороженной, прекращение спонтанной тромбоцитопенической кровоточивости,прирост числа тромбоцитов при переливании тромбоцитного концентрата), так иотрицательными (отторжение клеточных и плазменных элементов крови донора, рисквирусного и бактериального инфицирования, развитие гемосидероза, угнетениекроветворения, усиление тромбогенности, аллосенсибилизация, иммунологическиереакции). У больных с иммунодепрессией переливание клеточных компонентов кровиможет привести к развитию реакции «трансплантат против хозяина».

<span Monotype Corsiva"">         При переливании цельной консервированной крови, особенно длительных(более 7 суток) сроков хранения, реципиент получает наряду с необходимыми емукомпонентами функционально неполноценные тромбоциты, продукты распадалейкоцитов, антитела и антигены, которые могут стать причинойпосттрансфузионных реакций и осложнений.

<span Monotype Corsiva"">          В настоящее время утвердился принцип возмещения конкретных, недостающихорганизму больного компонентов крови при различных патологических состояниях.Показаний к переливанию цельной консервированной донорской крови нет, заисключением случаев острых массивных кровопотерь, когда отсутствуют кровезаменителиили плазма свежезамороженная, эритроцитная масса или взвесь. Цельнаяконсервированная донорская кровь используется при проведении обменногопереливания в терапии гемолитической болезни новорожденных.

<span Monotype Corsiva"">          Кровь доноров на станциях переливания крови (СПК) или в отделенияхпереливания крови в ближайшие часы (в зависимости от используемого консервантаи условий заготовки — выездных или стационарных) после получения должна бытьразделена на компоненты. Целесообразно использовать в лечении одного больногокомпоненты крови, заготовленные от одного или минимального числа доноров.

<span Monotype Corsiva"">          В целях профилактики посттрансфузионных осложнений, обусловленныхантигеном Келл, отделения и станции переливания крови выдают для переливания вклинику эритроцитную взвесь или массу, не содержащие этого фактора. Келлположительным реципиентам могут быть перелиты Келл положительные эритроциты.При переливании корректоров плазменно-коагуляционного гемостаза (все видыплазмы), тромбоцитного концентрата, лейкоцитного концентрата антиген Келл неучитывают.

<span Monotype Corsiva"">           Компоненты крови должны переливаться только той группы системы АВ0 и тойрезус-принадлежности, которая имеется у реципиента.

<span Monotype Corsiva"">          По жизненным показаниям и при отсутствии одногруппных по системе АВ0 компонентовкрови (за исключением детей) допускается переливание резус-отрицательной 0(I)группы крови реципиенту с любой другой группой крови в количестве до 500 мл.Резус-отрицательная эритроцитная масса или взвесь от доноров группы А(II) илиВ(III), по витальным показаниям могут быть перелиты реципиенту с AB(IV)группой, независимо от его резус-принадлежности. При отсутствии одногруппнойплазмы реципиенту может быть перелита плазма группы АВ(IV).

<span Monotype Corsiva"">         Во всех без исключения случаях переливания эритроцитсодержащихкомпонентов крови абсолютно обязательным является проведение до началапереливания проб на индивидуальную совместимость и в начале трансфузиибиологической пробы.

<span Monotype Corsiva"">        При поступлении больного в стационар в плановом порядке группу крови АВ0и резус-принадлежность определяет врач или другой специалист, имеющийподготовку по иммуносерологии. Бланк с результатом исследования вклеивают висторию болезни. Лечащий врач переписывает данные результата исследования налицевую сторону титульного листа истории болезни в правый верхний угол искрепляет своей подписью. Запрещается переносить данные о группе крови ирезус-принадлежности на титульный лист истории болезни с других документов.

<span Monotype Corsiva"">           Больным, имеющим в анамнезе указание на посттрансфузионные осложнения,беременности, закончившиеся рождением детей с гемолитической болезньюноворожденного, а также больным, имеющим аллоиммунные антитела, производятиндивидуальный подбор компонентов крови в специализированной лаборатории. Принеобходимости многократных трансфузий у больных с миелодепрессией илиапластическим синдромом исследуют фенотип больного с целью подборасоответствующего донора.

<span Monotype Corsiva"">           Переливание компонентов крови имеет право проводить лечащий или дежурныйврач, имеющий специальную подготовку, во время операции — хирург илианестезиолог, непосредственно не участвующий в операции или наркозе, а такжеврач отделения или кабинета переливания крови, специалист-трансфузиолог.

<span Monotype Corsiva"">          Перед тем, как приступить к переливанию компонентов крови, необходимоубедиться в их пригодности для переливания, идентичности групповойпринадлежности донора и реципиента по системам АВ0 и резус. Визуально,непосредственно врачом, переливающим трансфузионную среду, проверяетсягерметичность упаковки, правильность паспортизации, макроскопически оцениваетсякачество гемотрансфузионной среды. Определять годность гемотрансфузионной средынеобходимо при достаточном освещении непосредственно на месте хранения, недопуская взбалтывания. Критериями годности для переливания являются: дляцельной крови — прозрачность плазмы, равномерность верхнего слоя эритроцитов,наличие четкой границы между эритроцитами и плазмой; для плазмысвежезамороженной — прозрачность при комнатной температуре. При возможномбактериальном загрязнении цельной крови цвет плазмы будет тусклым, с серо-бурымоттенком, она теряет прозрачность, в ней появляются взвешенные частицы в видехлопьев или пленок. Такие гемотрансфузионные среды переливанию не подлежат.

<span Monotype Corsiva"">           Запрещается переливание компонентов крови, предварительно неисследованных на ВИЧ, гепатиты В и С, сифилис.

<span Monotype Corsiva"">         Транспортировка компонентов крови осуществляется только медицинскимперсоналом, несущим ответственность за соблюдение правил транспортировки.Компоненты крови во избежание гемолиза при транспортировке не должныподвергаться переохлаждению или перегреванию. При времени транспортировки менее30 мин она может производиться с использованием любых контейнеров,обеспечивающих достаточную изотермичность. При длительности транспортировкиболее получаса компоненты крови должны находиться в изотермическом контейнере(сумке-холодильнике). При еще более длительной транспортировке (несколькочасов) или при высокой температуре окружающей среды (выше 20°С) необходимоиспользование сухого льда или аккумуляторов холода, обеспечивающихизотермический режим в транспортном контейнере. Необходимо оберегать компонентыкрови от встряхивания, ударов, перевертывания и перегрева, клеточные компоненты- от замораживания.

<span Monotype Corsiva"">         Врач, производящий трансфузию компонентов крови, обязан, независимо отпроизведенных ранее исследований и имеющихся записей, лично провести следующиеконтрольные исследования непосредственно у постели реципиента:

<span Monotype Corsiva"">1.1.Перепроверить группу крови реципиента по системе АВ0, сверить полученныйрезультат с данными в истории болезни;

<span Monotype Corsiva"">1.2.Перепроверить группу крови по системе АВ0 донорского контейнера и сопоставитьрезультат с данными на этикетке контейнера;

<span Monotype Corsiva"">1.3.Сравнить группу крови и резус-принадлежность, обозначенные на контейнере, срезультатами исследования, ранее внесенными в историю болезни и только чтополученными;

<span Monotype Corsiva"">1.4.Провести пробы на индивидуальную совместимость по системам АВ0 и резусэритроцитов донора и сыворотки реципиента;

<span Monotype Corsiva"">1.5.Уточнить у реципиента фамилию, имя, отчество, год рождения и сверить их суказанными на титульном листе истории болезни. Данные должны совпадать, иреципиент должен их по возможности подтвердить (за исключением случаев, когдапереливание проводится под наркозом или пациент находится в бессознательномсостоянии);

<span Monotype Corsiva"">1.6.Провести биологическую пробу;

<span Monotype Corsiva""> 1.7.Необходимым предварительным условием медицинского вмешательства являетсяинформированное добровольное согласие гражданина в соответствии со статьей 32«Основ законодательства Российской Федерации об охране граждан» от22.07.93 N 5487-1 (Ведомости СНД и ВС РФ 19.08.93, N 33, ст.1318).

<span Monotype Corsiva"">           В случаях, когда состояние гражданина не позволяет ему выразить своюволю, а медицинское вмешательство неотложно, вопрос о его проведении винтересах гражданина решает консилиум, а при невозможности собрать консилиум — непосредственно лечащий (дежурный) врач с последующим уведомлением должностныхлиц лечебно-профилактического учреждения.

<span Monotype Corsiva"">            План выполнения операции переливания компонентов крови обсуждается исогласовывается с пациентом в письменном виде, а при необходимости — с егоблизкими. Согласие пациента оформляется в соответствии с образцом и подшиваетсяк карте стационарного больного или карте амбулаторного больного.

<span Monotype Corsiva"">            Переливание гемотрансфузионных сред производится медицинским персоналомпри соблюдении правил асептики и антисептики с использованием одноразовыхустройств для внутривенного введения, имеющих фильтр.

<span Monotype Corsiva"">            С целью предупреждения иммунологических реакций у определенногоконтингента больных (дети, беременные, лица с иммунодепрессией) переливание эритроцитной массы и взвеси, тромбоцитного концентратаследует проводить с использованием специальных лейкоцитарных фильтров,разрешенных к клиническому применению Министерством здравоохранения РоссийскойФедерации.

<span Monotype Corsiva"">

<span Lucida Console"">2.1. Иммуносерологическиеисследования при переливании крови, корректоров гемостаза и фибринолиза,средств коррекции иммунитета

<span Lucida Console"">

<span Monotype Corsiva"">         При переливании эритроцитов, корректоров гемостаза и фибринолиза,средств коррекции иммунитета (плановом, экстренном) врач, выполняющийтрансфузию, обязан:

<span Monotype Corsiva"">2.1. Определить группу крови АВ0 ирезус-принадлежность реципиента и донора (по эритроцитам в контейнере).

<span Monotype Corsiva"">Группа

<span Monotype Corsiva"">Подгруппа

<span Monotype Corsiva"">Агглютиногены

<span Monotype Corsiva""> в эритроцитах

<span Monotype Corsiva"">Агглютинины в сыворотке

<span Monotype Corsiva"">Распространенность

<span Monotype Corsiva"">

<span Monotype Corsiva"">0

ab<span Monotype Corsiva"">(I)

<span Monotype Corsiva"">нет

<span Monotype Corsiva"">нет

a и b

<span Monotype Corsiva"">33,5 %

<span Monotype Corsiva"">А

<span Monotype Corsiva";mso-ansi-language: EN-US">B<span Monotype Corsiva"">(II)

<span Monotype Corsiva"">А1(II)

<span Monotype Corsiva"">А1

b и (a2-крайне редко)

<span Monotype Corsiva"">32,1 %

<span Monotype Corsiva"">А2(II)

<span Monotype Corsiva"">А2

b  и (a1 — в 20 % случаев)

<span Monotype Corsiva"">5,7 %

<span Monotype Corsiva"">В

<span Monotype Corsiva";mso-ansi-language: EN-US">a<span Monotype Corsiva"">(III)

<span Monotype Corsiva"">нет

<span Monotype Corsiva"">В

a

<span Monotype Corsiva"">20,6 %

<span Monotype Corsiva"">AB

<span Monotype Corsiva";mso-ansi-language: EN-US">0<span Monotype Corsiva"">(IV)

<span Monotype Corsiva"">АВ(IV)

<span Monotype Corsiva"">А1 и В

нет (a2-крайне редко)<span Monotype Corsiva"">

<span Monotype Corsiva"">6,8 %

<span Monotype Corsiva"">А2В(IV)

<span Monotype Corsiva"">А2 и В

нет (a1 — в 20 % случаев)

<span Monotype Corsiva"">1,3 %

<span Monotype Corsiva"">           2.2. Провести пробу на индивидуальную совместимость крови реципиента идонора (см. ниже) одним из двух способов:

<span Monotype Corsiva"">- первый способ: двухэтапная проба в пробиркахс антиглобулином;

<span Monotype Corsiva"">- второй способ: на плоскости при комнатнойтемпературе и одна из трех проб (непрямая реакция Кумбса, реакция конглютинациис 10% желатином или реакция конглютинации с 33% полиглюкином).

<span Monotype Corsiva"">         По жизненным показаниям, в случае, если группа крови и резуспринадлежность реципиента неизвестны, врач, выполняющий трансфузию можетперелить реципиенту кровь (эритроцитная масса, взвесь) группы 0(I) резусотрицательная при обязательном проведении проб на индивидуальную совместимостьи биологической пробы.

<span Monotype Corsiva"">           При наличии у реципиента антиэритроцитарных, антилейкоцитарныхили антитромбоцитарных антител, подбор компонентовкрови производят в специализированной лаборатории. Если эритроцитная масса иливзвесь подобраны реципиенту индивидуально в специализированной лаборатории, врач,выполняющий трансфузию перед переливанием определяет группу крови реципиента,донора и проводит только одну пробу на индивидуальную совместимость — наплоскости при комнатной температуре. Групповую и резус-принадлежность донора врач, выполняющий трансфузию,устанавливает по этикетке на контейнере с трансфузионнойсредой, пробу на индивидуальную совместимость не проводит.

<span Monotype Corsiva"">

<span Lucida Console"">Техника иммуносерологических исследований

<span Lucida Console"">

<span Monotype Corsiva"">3.1. Определение группы крови АВ0                                     

<span Monotype Corsiva"">3.2. Определение резус-принадлежности                                 

<span Monotype Corsiva"">         Определение группы крови, резус-принадлежности, пробу на индивидуальнуюсовместимость крови донора и реципиента проводят в соответствии с инструкциямипо иммуносерологии. Руководствуются также инструкциями-вложениями, которыеприлагаются к набору реагентов предприятием изготовителем. Используютэритроциты и сыворотку крови реципиента не более двухдневного срока храненияпри температуре +2 — 8°С.

<span Monotype Corsiva"">          Для метода агглютинации на плоскости и метода конглютинации в пробиркахс 10% желатином или 33% полиглюкином берут осадок неотмытыхэритроцитов.

<span Monotype Corsiva"">          Для двухступенчатой пробы в пробирках с иммуноглобулином и непрямойпробы Кумбса эритроциты трижды отмывают физиологическим раствором. Отмываниеэритроцитов производят обычным образом.

<span Monotype Corsiva"">3.1.Определение группы крови АВ0

<span Monotype Corsiva"">           На пласншет в три точки под обозначениями 0(I),А(II) и В(III) помещают по 2 капле (0,1 мл) реагента и рядом по одной каплеосадка эритроцитов (0,01 — 0,02 мл при использовании гемагглютинирующихсывороток; 0,02 — 0,03 мл при использовании цоликлонов).Сыворотку и эритроциты перемешивают стеклянной палочкой. Пластинку периодическипокачивают, наблюдая за ходом реакции в течение 3-х мин при использовании цоликлонов; 5 мин при использовании гемагглютинирующихсывороток. По истечении 5 мин в реагирующую смесь можно добавить по 1 — 2 капли(0,05 — 0,1 мл) физиологического раствора для снятия возможной неспецифическойагрегации эритроцитов.

<span Monotype Corsiva"">           Учет результатов определения группы крови АВ0 (с цоликлонами)

<span Monotype Corsiva"">Агглютинация эритроцитов с реагентами

<span Monotype Corsiva"">Кровь принадлежит к группе

<span Monotype Corsiva"">Анти-А

<span Monotype Corsiva"">

<span Monotype Corsiva"">Анти-В

<span Monotype Corsiva"">

<span Monotype Corsiva"">Анти-АВ

<span Monotype Corsiva"">

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">0

ab<span Monotype Corsiva"">(I)

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">А

<span Monotype Corsiva";mso-ansi-language: EN-US">B<span Monotype Corsiva"">(II)

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">В

<span Monotype Corsiva";mso-ansi-language: EN-US">a<span Monotype Corsiva"">(III)

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">AB

<span Monotype Corsiva";mso-ansi-language: EN-US">0<span Monotype Corsiva"">(IV)

<span Monotype Corsiva"">             Учет результатов определения группы крови АВ0 (с использованиемстандартных изогемагглютинирующих сывороток)

<span Monotype Corsiva"">Агглютинация эритроцитов с сыворотками

<span Monotype Corsiva"">Кровь принадлежит к группе

<span Monotype Corsiva"">0(I)

<span Monotype Corsiva"">А(II)

<span Monotype Corsiva"">В(III)

<span Monotype Corsiva"">AB(IV)

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">

<span Monotype Corsiva"">0

ab<span Monotype Corsiva"">(I)

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">

<span Monotype Corsiva"">А

<span Monotype Corsiva";mso-ansi-language: EN-US">B<span Monotype Corsiva"">(II)

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">

<span Monotype Corsiva"">В

<span Monotype Corsiva";mso-ansi-language: EN-US">a<span Monotype Corsiva"">(III)

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">AB

<span Monotype Corsiva";mso-ansi-language: EN-US">0<span Monotype Corsiva"">(IV)

<span Monotype Corsiva"">         Учет результатов определения группы крови АВ0 (с использованиемперекрестного способа)

<span Monotype Corsiva"">Агглютинация эритроцитов со стандартными сыворотками

<span Monotype Corsiva"">Агглютинация эритроцитов со стандартными эритроцитами

<span Monotype Corsiva"">Кровь принадлежит к группе

<span Monotype Corsiva"">0(I)

<span Monotype Corsiva"">А(II)

<span Monotype Corsiva"">В(III)

<span Monotype Corsiva"">AB(IV)

<span Monotype Corsiva"">0(I)

<span Monotype Corsiva"">А(II)

<span Monotype Corsiva"">В(III)

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">0

ab<span Monotype Corsiva"">(I)

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">А

<span Monotype Corsiva";mso-ansi-language: EN-US">B<span Monotype Corsiva"">(II)

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">В

<span Monotype Corsiva";mso-ansi-language: EN-US">a<span Monotype Corsiva"">(III)

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">+

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">-

<span Monotype Corsiva"">_

<span Monotype Corsiva"">AB

<span Monotype Corsiva";mso-ansi-language: EN-US">0<span Monotype Corsiva"">(IV)

<span Monotype Corsiva"">              Примечание: Знаком (+) обозначена агглютинация, знаком (-) — отсутствиеагглютинации.

<span Monotype Corsiva"">          При наличии агглютинации со всеми тремя реагентами необходимо исключитьнеспецифическую агглютинацию исследуемых эритроцитов. Для этого к каплеэритроцитов вместо цоликлонов добавляют каплюфизиологического раствора, а вместо гемагглютинирующих сывороток сывороткугруппы AB(IV). Кровь можно отнести к группе AB(IV) только при отсутствииагглютинации эритроцитов в физиологическом растворе или сыворотке AB(IV).

<span Monotype Corsiva"">3.2.Определение резус-принадлежности

<span Monotype Corsiva"">           3.2.1. Экспресс — метод:

<span Monotype Corsiva"">        На дно пробирки вносят 1 каплю антирезусной сыворотки и 1 каплю исследуемой крови, ихсмешивают, пробирку переворачивают так, чтобы содержимое растекалось по стенке.Спустя 5 мин смотрят за наличием агглютинации. Для исключения ложной агрегацииэритроцитов необходимо добавить 2-3 мл физиологического  раствора. Наличие агглютинации – кровь резус-положительна.

<span Monotype Corsiva"">         3.2.2. Реакция агглютинации на плоскости с помощью цоликлонованти-D супер:

<span Monotype Corsiva"">Наносят большую каплю (около 0,1 мл) реагентана пластинку или планшет. Наносят рядом маленькую каплю (0,02-0,03 мл)исследуемых эритроцитов. Тщательно смешивают реагент с эритроцитами стекляннойпалочкой.

<span Monotype Corsiva"">Через 10 — 20 с мягко покачивают пластинку.Несмотря на то, что четкая агглютинация наступает в первые 30 с, результатыреакции учитывают через 3 мин после смешивания.

<span Monotype Corsiva"">При наличии агглютинации исследуемая кровьмаркируется как резус положительная, при отсутствии — как резус отрицательная.

<span Monotype Corsiva"">Для определения резус-принадлежности ускореннымметодом на плоскости при комнатной температуре могут быть использованы поликлональные сыворотки анти-D снеполными антителами, приготовленные в комбинации с коллоидами (альбумином,полиглюкином).

<span Monotype Corsiva"">          3.2.2 Метод конглютинации с 10% желатином:

<span Monotype Corsiva"">Используют реагенты, содержащие неполные поликлональные антитела (сыворотки анти-D)или неполные моноклональные антитела (цоликлоны анти-D).

<span Monotype Corsiva"">В 2 пробирки вносят по 0,02 — 0,03 мл осадкаэритроцитов, для чего выдавливают из пипетки небольшую каплю эритроцитов икасаются ею дна пробирки. Затем в первую пробирку добавляют 2 капли (0,1 мл)желатина и 2 капли (0,1 мл) реагента, во вторую (контрольную) пробиркудобавляют 2 капли (0,1 мл) желатина и 2 капли (0,1 мл) физиологическогораствора.

<span Monotype Corsiva"">Содержимое пробирок перемешивают встряхиванием,после чего их помещают в водяную баню на 15 мин или термостат на 30 мин притемпературе +46 — 48°С. По истечении указанного времени в пробирки добавляют по5 — 8 мл физиологического раствора и перемешивают содержимое путем 1 — 2-кратного переворачивания пробирок.

<span Monotype Corsiva"">Результат учитывают, просматривая пробирки насвет невооруженным глазом или через лупу. Агглютинация эритроцитовсвидетельствует о том, что исследуемый образец крови резус положительный,отсутствие агглютинации — о том, что испытуемая кровь резус отрицательная. Вконтрольной пробирке агглютинация эритроцитов должна отсутствовать.

<span Monotype Corsiva"">Для определения резус-принадлежности ускореннымметодом в пробирке при комнатной температуре может быть использовануниверсальный реагент, представляющий собой сыворотку анти-Dс неполными антителами, разведенную 33% полиглюкином.

<span Monotype Corsiva"">

<span Lucida Console"">4. Пробы на индивидуальнуюсовместимость крови донора и реципиента

<span Monotype Corsiva"">4.1. Двухэтапная проба в пробирках сантиглобулином                   

<span Monotype Corsiva"">4.2. Проба на совместимость на плоскости прикомнатной температуре    

<span Monotype Corsiva"">4.3. Непрямая проба Кумбса                                             

<span Monotype Corsiva"">4.4. Проба на совместимость с применением 10%желатина                

<span Monotype Corsiva"">4.5. Проба на совместимость с применением 33%полиглюкина             

<span Monotype Corsiva"">         Пробана индивидуальную совместимость позволяет убедиться в том, что у реципиента нетантител, направленных против эритроцитов донора и таким образом предотвратитьтрансфузию эритроцитов, несовместимых с кровью больного.

<span Monotype Corsiva"">        Проба на совместимость, выполняемая на плоскости при комнатнойтемпературе, имеет целью выявить у реципиента полные групповые агглютининысистемы АВ0, MNSs, Lewis идр. Проба на совместимость с применением 10% желатина, 33% полиглюкина,непрямая проба Кумбса предназначена для выявления у реципиента неполныхгрупповых антител. Двухэтапная проба в пробирках с антиглобулиномпредусматривает выявление и тех и других антител, в том числе групповыхгемолизинов.

<span Monotype Corsiva"">          Наиболее чувствительной и рекомендуемой является двухэтапная проба впробирках с антиглобулином, затем комбинация двух проб — пробы на плоскости прикомнатной температуре и непрямой пробы Кумбса. Вместо непрямой пробы Кумбсаможет быть применена реакция конглютинации с 10% желатином или реакцияконглютинации с 33% полиглюкином. Последняя проба уступает по чувствительностипервым двум, однако занимает меньше времени.

<span Monotype Corsiva"">           4.1. Двухэтапная проба впробирках с антиглобулином

<span Monotype Corsiva"">Первый этап.

<span Monotype Corsiva""> В маркированную пробирку вносят 2объема (200 мкл) сыворотки реципиента и 1 объем (100 мкл) 2% взвеси триждыотмытых эритроцитов донора, суспендированных в физиологической растворе илиLISS (раствор низкой ионной силы). Содержимое пробирки перемешивают ицентрифугируют при 2500 об/мин (около 600g) в течение 30 с. Затем оценивают наличиегемолиза в надосадочной жидкости, после чего осадок эритроцитов ресуспендируют, слегка постукивая кончиком пальца по днупробирки, и определяют наличие агглютинации эритроцитов. При отсутствиивыраженного гемолиза и/или агглютинации переходят к выполнению второго этапапробы с использованием антиглобулиновой сыворотки.

<span Monotype Corsiva"">Второй этап.

<span Monotype Corsiva""> Пробирку помещают в термостат притемпературе 37°С на 30 мин, после чего снова оценивают наличие гемолиза и/илиагглютинации эритроцитов. Затем эритроциты трижды отмывают физиологическимраствором, добавляют 2 объема (200 мкл) антиглобулиновойсыворотки для пробы Кумбса и перемешивают. Пробирки центрифугируют в течение 30с, осадок эритроцитов ресуспензируют и оцениваютналичие агглютинации.

<span Monotype Corsiva"">           Учет результатов проводятневооруженным глазом или через лупу. Выраженный гемолиз и/или агглютинацияэритроцитов указывает на присутствие в сыворотке реципиента групповыхгемолизинов и/или агглютининов, направленных против эритроцитов донора, исвидетельствует о несовместимости крови реципиента и донора. Отсутствиегемолиза и/или агглютинации эритроцитов свидетельствует о совместимости кровиреципиента и донора.

<span Monotype Corsiva"">          4.2. Проба на совместимость наплоскости при комнатной температуре

<span Monotype Corsiva"">На пластинку наносят 2 — 3 капли сывороткиреципиента и добавляют небольшое количество эритроцитов с таким расчетом, чтобысоотношение эритроцитов и сыворотки было 1:10 (для удобства рекомендуетсясначала выпустить через иглу несколько капель эритроцитов из контейнера на крайпластинки, затем оттуда стеклянной палочкой перенести маленькую каплюэритроцитов в сыворотку). Далее эритроциты перемешивают с сывороткой, пластинкуслегка покачивают в течение 5 мин, наблюдая за ходом реакции. По истеченииуказанного времени в реагирующую смесь можно добавить 1 — 2 каплифизиологического раствора для снятия возможной неспецифической агрегацииэритроцитов.

<span Monotype Corsiva"">              Учет результатов.

<span Monotype Corsiva""> Наличие агглютинацииэритроцитов означает, что кровь донора несовместима с кровью реципиента и недолжна быть ему перелита. Если по истечении 5 мин агглютинация эритроцитовотсутствует, то это означает, что кровь донора совместима с кровью реципиентапо групповым агглютиногенам.

<span Monotype Corsiva"">             4.3. Непрямая проба Кумбса

<span Monotype Corsiva"">В пробирку вносят одну каплю (0,02 мл) осадкатрижды отмытых эритроцитов донора, для чего выдавливают из пипетки небольшуюкаплю эритроцитов и касаются ею дна пробирки, и добавляют 4 капли (0,2 мл)сыворотки реципиента. Содержимое пробирок перемешивают встряхиванием, послечего их помещают на 45 мин в термостат при температуре +37°С. По истеченииуказанного времени эритроциты вновь трижды отмывают и готовят 5% взвесь вфизиологическом растворе. Далее 1 каплю (0,05 мл) взвеси эритроцитов нафарфоровую пластинку, добавляют 1 каплю (0,05 мл) антиглобулиновойсыворотки и перемешивают стеклянной палочкой. Пластинку периодически покачиваютв течение 5 мин.

<span Monotype Corsiva"">              Учет результатов

<span Monotype Corsiva""> проводят невооруженнымглазом или через лупу. Агглютинация эритроцитов свидетельствует о том, чтокровь реципиента и донора несовместимы, отсутствие агглютинации являетсяпоказателем совместимости крови донора и реципиента.

<span Monotype Corsiva"">              4.4. Проба на совместимость сприменением 10% желатина

<span Monotype Corsiva"">В пробирку вносят 1 небольшую каплю (0,02 — 0,03) мл эритроцитов донора, для чего выдавливают из пипетки небольшую каплюэритроцитов и касаются ею дна пробирки, добавляют 2 капли (0,1 мл) желатина и 2капли (0,1 мл) сыворотки реципиента. Содержимое пробирок перемешиваютвстряхиванием, после чего их помещают в водяную баню на 15 мин или термостат на30 мин при температуре +46 — 48°С. По истечении указанного времени в пробиркидобавляют 5 — 8 мл физиологического раствора и перемешивают содержимое путем 1- 2-кратного переворачивания пробирок.

<span Monotype Corsiva"">Результат учитывают, просматривая пробирки насвет невооруженным глазом или через лупу. Агглютинация эритроцитовсвидетельствует о том, что кровь реципиента и донора несовместимы, отсутствиеагглютинации является показателем совместимости крови донора и реципиента.

<span Monotype Corsiva"">           4.5.Проба на совместимость с применением 33% полиглюкина

<span Monotype Corsiva"">В пробирку вносят 2 капли (0,1 мл) сывороткиреципиента 1 каплю (0,05) мл эритроцитов донора и добавляют 1 каплю (0,1 мл)33% полиглюкина. Пробирку наклоняют до горизонтального положения, слегкапотряхивая, затем медленно вращают таким образом, чтобы содержимое еерастеклось по стенкам тонким слоем. Такое растекание содержимого пробирки постенкам делает реакцию более выраженной. Контакт эритроцитов с сывороткойбольного при вращении пробирки следует продолжать не менее 3 мин. Через 3 — 5мин в пробирку добавляют 2 — 3 мл физиологического раствора и перемешиваютсодержимое путем 2 — 3-х кратного перевертывания пробирки, не взбалтывая.Результат учитывают, просматривая пробирки на свет невооруженным глазом иличерез лупу. Агглютинация эритроцитов свидетельствует о том, что кровьреципиента и донора несовместимы, отсутствие агглютинации является показателемсовместимости крови донора и реципиента.

<span Monotype Corsiva"">

<span Lucida Console"">5. Причины ошибок приопределении группы крови, Rh принадлежности ипроведении проб на индивидуальную совместимость и меры их предупреждения

<span Monotype Corsiva"">           Ошибки при определении группы крови, Rhпринадлежности и проведении проб на индивидуальную совместимость возникают принарушении техники выполнения исследования или в случаях трудноопределимых группкрови.

<span Monotype Corsiva"">5.1. Технические ошибки                                               

<span Monotype Corsiva"">5.2. Трудноопределимые группы крови                                    

<span Monotype Corsiva"">

<span Monotype Corsiva"">           5.1. Технические ошибки

<span Monotype Corsiva"">          5.1.1. Ошибочный порядок расположения реагентов. При правильной оценкерезультата в каждом    отдельно взятомреагенте можно сделать неправильное заключение о группе крови и резуспринадлежности, если нарушен порядок расположения реагентов в штативе или на пластинке.Поэтому каждый раз при определении группы крови следует проверить расположениереагентов, а также визуально оценить их качество, исключить использованиепомутневших, частично высохших реагентов, реагентов с истекшим сроком годности.

<span Monotype Corsiva"">            5.1.2. Температурные условия. Определение группы крови производят притемпературе не ниже 15°С, поскольку исследуемая кровь может содержатьполивалентные холодовые агглютинины, вызывающиенеспецифическое склеивание эритроцитов при пониженной температуре. Видимостьагглютинации может создавать образование «монетных столбиков».Неспецифическая агрегация эритроцитов, как правило, распадается последобавления 1 — 2 капель физиологического

еще рефераты
Еще работы по медицине