Реферат: Биотехнология, биопрепараты (вакцины, сывортки, прививки и т.д.)
<span Courier New"">
<span Courier New""> 2БИОТЕХНОЛОГИЯ.БИОПРЕПАРАТЫ.
<span Courier New"">
<span Courier New""> БИОТЕХНОЛОГИЯ — технология, т.е. способ получения продуктов
<span Courier New"">из биологическихобъектов или с применением биологических объек-
<span Courier New"">тов. (Спор — этонаука или производство.)
<span Courier New""> В качестве биологических объектов чаще всего используются
<span Courier New"">клетки(микроорганизмов, растительного илиживотного происхож-
<span Courier New"">дения).Преимущества:
<span Courier New""> 1. клетки являются своего рода биофабриками белков, жиров,
<span Courier New"">углеводов,витаминов, нуклеиновых кислот, аминокислот, антибио-
<span Courier New"">тиков, гормонов,антител, ферментов, спиртов;
<span Courier New""> 2. клетки чрезвычайно быстро воспроизводятся(бактерии - за
<span Courier New"">20-60 мин.,дрожжевые — за 1,5-2 часа, животная — 24 часа),
<span Courier New""> 3. биосинтез сложных веществ, таких как белки, антибиотики,
<span Courier New"">антигены,антитела и др. значительно экономичнее и технологи-
<span Courier New"">ческидоступнее, чем химический синтез. Длябиосинтеза исполь-
<span Courier New"">зуются отходысельскохозяйственной, рыбнойпродукции, пищевой
<span Courier New"">промышленности.
<span Courier New""> 4. возможность проведения биотехнологического процесса в
<span Courier New"">промышленныхмасштабах.
<span Courier New"">
<span Courier New""> _Направления биотехнологии .:
<span Courier New""> — медицинская (фармацевтическая, иммунная)
<span Courier New""> — сельскохозяйственная (ветеринарная,растений)
<span Courier New""> — промышленная (пищевая, легкая промышленность, химическая,
<span Courier New"">энергетическая)
<span Courier New""> — экологическая (очистка, деградация).
<span Courier New"">
<span Courier New""> _Историябиотехнологии
<span Courier New""> ( _историческиедостижения .)
<span Courier New"">
<span Courier New""> — Земледелие, животноводство — 10-11 тыс.лет назад.
<span Courier New""> — Селекция (интуитивная, например, пшеницы, домашних живот-
<span Courier New"">ных), затемнаучная.
<span Courier New""> — Биотехнология возникла примерно 5-6 тысячлет назад, когда
<span Courier New"">люди научилисьвыпекать хлеб, варить пиво, приготовлять сыр и
<span Courier New"">вино.
<span Courier New""> — В 19 веке Пастером была открыта природаброжения (начался
<span Courier New"">научный этапбиотехнологии).
<span Courier New""> — Открытие многих микроорганизмов и способов их получения в
<span Courier New"">большомколичестве (сформировалась техническая микробиология);
<span Courier New"">в настоящее времяиз 100000 видов микроорганизмов используется
<span Courier New"">не более 100 5(см. ниже) 0. С 70-80-х годов ХХ века начали полу-
<span Courier New"">чатьштаммы-суперпродуценты.
<span Courier New""> — Искусственное оплодотворение вживотноводстве, искусствен-
<span Courier New"">ное опыление врастеневодстве. Трансплантация эмбрионов(в жи-
<span Courier New"">вотноводстве). Разработка технологии искусственногооплодотво-
<span Courier New"">рения человека.
<span Courier New""> — Биодобавки в медицине, животноводстве,растеневодстве.
<span Courier New""> — Трансплантация органов. Переливание крови. Позднее созда-
<span Courier New"">ние искусственныхорганов (искусственная почка ...).
<span Courier New""> — Выделение ферментов, использование иммобилизованных фер-
<span Courier New"">ментов в молочномделе и пр.
<span Courier New""> — Разработка получения МАТ (моноклональныхантител) гибридом
<span Courier New"">(Келлер иМильштейн, 1975; Нобелевские лауреаты)
<span Courier New""> — Разработка и применение биосенсоров — технических средств
<span Courier New"">детектированиявеществ (с помощью антител, ферментов,рецепто-
<span Courier New"">ров...). Ужесозданы биосенсоры более 100 веществ. /1990г./
<span Courier New"">
<span Courier New""> _- Развитие геннойинженерии .. Технология включениягена (ин-
<span Courier New"">сулина и пр.)Е.coli.
<span Courier New""> — Использование микроорганизмов(бактерий, дрожжей, виру-
<span Courier New"">сов) как реципиентов чужеродного генетическогоматериала для
<span Courier New"">получениеБАВ. Например, получены 2рекомбинантные 0 штаммыЕ.с.,
<span Courier New"">продуцирующиеинтерфероны, инсулин, гормон роста; В.subtilis, -
<span Courier New"">вырабатывающиеинтерферон, инсулин; дрожжи — продуценты ИЛ, ре-
<span Courier New"">комбинантныевирусы осповакцины, синтезирующие антиген гепатита
<span Courier New"">В. Производстволекарственных форм (интерлейкины, интерферон,
<span Courier New"">тканевыйактиватор плазминогена, фактор VIII, эритропоэтин, ре-
<span Courier New"">лаксин, использующийся для расслабления шейки матки, гормон
<span Courier New"">роста, фактор роста эпидермисаколониестимулирующие факторы,
<span Courier New"">МАТ). 4В клиниках сегодня (1988г.) проходитиспытания около 150
<span Courier New""> 4биотехнологическихлекарств. 0
<span Courier New""> — Разработка способов переноса генов (впрыскивание в яйцек-
<span Courier New"">летку,электроток, вирусами, плазмидами).Некоторые методы пе-
<span Courier New"">реноса дают врезультате не трансгенных животных, а 2химер 0. Для
<span Courier New"">этого в эмбрионживотного вводят группу эмбриональных клеток
<span Courier New"">другоговида. Получаемое потомство построено из«мозаики» кле-
<span Courier New"">ток, часть которых несет гены одного из родителей, а часть -
<span Courier New"">другого. 4Так, широко известная сегодня «ковца» (химеракозы и
<span Courier New""> 4овцы),выведенная в Кембридже (Англия), является такой химерой.
<span Courier New""> 4От козыона унаследовала рога, а от овцы — лохматую шкуру. 0
<span Courier New""> — В клетки молочных желез овец введены геныфактора IХ ССК
<span Courier New"">(лечениегемофилии В), другим — альбумин (используется после
<span Courier New"">хирургическихопераций).
<span Courier New""> — В 1982г. Ричарду Палмитеру и Ральфу Бринстеру удалось пе-
<span Courier New"">ресадить ген гормона роста крысы мышке. В итоге трансгенная
<span Courier New"">мышь была в 1,5раза большего размера, чем обычные.
<span Courier New""> — Разработка автоматизированных синтезаторовгена. Получение
<span Courier New"">рекомбинантныхДНК. Разработка технологии репарацииДНК. С по-
<span Courier New"">мощью ферментоврестрикции (их обнаружено более 400) разрезается
<span Courier New"">кольцевая плазмида,вставляется новый участок ДНК.
<span Courier New""> — Генноинженерные микробы (например, «форсбан», защищающий
<span Courier New"">растения отзаморозков), семена и пр. 4Рекомбинантные организмы
<span Courier New""> 4попадают в окружающую среду (известно более 20случаев). Нега-
<span Courier New""> 4тивныепоследствия не обнаружены. 0
<span Courier New""> — Разработан способ усиления естественнойспособности бакуло-
<span Courier New"">вирусов поражатьнасекомых-вредителей, введя в них гены ДНК, ко-
<span Courier New"">дирующиеяды. Если в вирусы встроить гены белковчеловека, то в
<span Courier New"">организме хозяина(насекомого) они будут усиленно продуцировать
<span Courier New"">данные белки.
<span Courier New""> — Клонирование.
<span Courier New""> — Технология гибридизации фрагментов ДНК иРНК, на основе ко-
<span Courier New"">торой разработаныразличные методы ( ПЦР = полимеразная цепная
<span Courier New"">реакция/Мюллис,1983/, лигазная цепная реакция, Q-бета-система и
<span Courier New"">др.).
<span Courier New""> — Созданная технология получения гомозиготных «knockout»-мы-
<span Courier New"">шей сотсутствием в их геноме тех или иных генов /Koller
<span Courier New"">B.H.,1992/.
<span Courier New"">
<span Courier New""> _Использование микроорганизмов
<span Courier New""> — из грибов для получения антибиотиков используются актино-
<span Courier New"">мицеты (родStreptomyces), Penicillium chrysogenum, Clphalospo-
<span Courier New"">rum acremonium,Streptomyces spp и др.
<span Courier New""> — дрожжи (в хлебопечении, пивоварении, виноделии, получении
<span Courier New"">соков, кормовогобелка, питательный сред для выращивания бакте-
<span Courier New"">рий и культурживотных клеток); Из 500 известных видовдрожжей
<span Courier New"">используетсятолько несколько;
<span Courier New""> — род Acetobacter для превращения этанола вуксусную кислоту
<span Courier New"">и уксуснойкислоты в газ;
<span Courier New""> — род Bacillus — для получения ферментов(В.subtilis)
<span Courier New""> — средства защиты растений(В.thuringiensis);
<span Courier New""> — род клостридий — для сбраживания сахаров вацетон, бутанол;
<span Courier New""> — молочно-кислые бактерии (lactobacillus,Leuconostoc,Strep-
<span Courier New"">tococcus);
<span Courier New""> — псевдомонады для получения витаминаВ 412 0;
<span Courier New""> — коринебактерии glutamicum для полученияаминокислот и др.
<span Courier New"">
<span Courier New"">
<span Courier New""> 2БИОПРЕПАРАТЫ
<span Courier New"">
<span Courier New""> 3Классификация
<span Courier New""> I. 2Биопрепараты, использующиеся invivo
<span Courier New""> 1. АГ-ые (вакцины /в т.ч. анатоксины/, аллергены, лизаты
<span Courier New"">микробов длякожных проб), создающие активный иммунитет. Специ-
<span Courier New"">фические АТ и Ткпоявляются в кровотоке примерно через неделю у
<span Courier New"">здоровогочеловека (у лиц с ИД — позже).
<span Courier New""> 2. АТ-содержащие (антисыворотки, гамма-глобулины, МАТ, им-
<span Courier New"">мунноемолоко), создающие за счет готовых АТпассивный иммуни-
<span Courier New"">тет. Однако«примеси» данных биопрепаратов и ксеногенные (лоша-
<span Courier New"">диные и пр.) АТзапускают активный «вредоносный» иммунитет. По-
<span Courier New"">этомуиспользование желательно в течение 1 недели после первой
<span Courier New"">инъекции (до появления вторичных АТ и избежания ИК-ыхосложне-
<span Courier New"">ний,васкулитов). Антисыворотки вводят толькопо жизненным по-
<span Courier New"">казаниям.
<span Courier New""> 3. Иммунокорректоры
<span Courier New""> — животного происхождения (цитомедины, интерлейкины, интер-
<span Courier New"">фероны, факторыроста, гормоны /глюкокортикоиды и др./)
<span Courier New""> — растительного происхождения (аллергены,лектины)
<span Courier New""> — микробного происхождения (БЦЖ,продигиозан, антибиотики)
<span Courier New""> — химические иммунокорректоры
<span Courier New""> 4. Бактериофаги.
<span Courier New""> Бактериофаги относятся к эффективнымпрепаратам антимикробно-
<span Courier New"">го действия, обладающим строгой специфичностью и не вызывающим
<span Courier New"">развитиядисбактериозов, как это имеет местопри использовании
<span Courier New"">антибиотиков.
<span Courier New""> II. 2Биопрепараты, использующиеся invitro
<span Courier New""> — Диагностикумы (для РНГА) антигеновмикробов (самих клеток,
<span Courier New"">лизатов, или очищенных АГ-ов), использующиеся в серологических
<span Courier New"">реакциях. Иммунодиагностикумы — это часто взвесьизвестных уби-
<span Courier New"">тых микробов. Для инактивации используютвысокую температуру,
<span Courier New"">химическиевещества (формалин, спирт, ацетон, фенол), ультраз-
<span Courier New"">вук, ультрафиолетовые и рентгеновские лучи. При выделениииз
<span Courier New"">клеток различныхАГ используют методы разрушения, экстракции,
<span Courier New"">обработкуферментами и различными детергентами, центрифугирова-
<span Courier New"">ние. /2551к/
<span Courier New""> — Антигены, в т.ч. анатоксины /токсины/ дляпроведения РП,
<span Courier New"">РН (для постановкиконтроля в серологии).
<span Courier New""> — Диагностические антисыворотки. Для удаления из антисыворо-
<span Courier New"">токгруппоспецифических антител в сыворотку последовательно до-
<span Courier New"">бавляютмикроорганизмы, в состав которых входятгрупповые анти-
<span Courier New"">гены (методКастеллани). Таким образом получаютадсорбированные
<span Courier New"">сыворотки,которые содержат антитела к определенному виду микро-
<span Courier New"">бов. /2551к/
<span Courier New""> — МАТ (мышиные) для ИФА, иммуноблоттинга, ИФМ и пр. сероло-
<span Courier New"">гических реакций.
<span Courier New"">
<span Courier New""> АЛЛЕРГЕНЫ
<span Courier New"">
<span Courier New""> Известно более 200 тысяч аллергенов.
<span Courier New""> Аллергией страдает 20% населения земногошара.
<span Courier New"">
<span Courier New""> I. ЭНДОАЛЛЕРГЕНЫ
<span Courier New""> — тепловые — тепловая аллергия (наперегрев),
<span Courier New""> — ожоговые белки («аллергия наУФ»),
<span Courier New""> — холодовые эндоаллергены (измененная конформация белков на
<span Courier New"">холоду) — холодовая аллергия,
<span Courier New""> — появляющиеся новые антигенные детерминантыпри физнагрузке
<span Courier New"">(«аллергияна физнагрузку»)
<span Courier New""> — появляющиеся новые антигенные детерминанты при стрессе
<span Courier New"">(«аллергияна стресс»)
<span Courier New"">
<span Courier New""> II. ЭКЗОАЛЛЕРГЕНЫ
<span Courier New""> 31) Растительного происхождения
<span Courier New""> Официально зарегистрировано 600 (598) видов аллергических
<span Courier New"">растений.
<span Courier New""> 1Поллинозы на пыльцу 0. Количество пыльцы в воздухе max ранним
<span Courier New"">вечером и minутром, поэтому период активнойдеятельности надо
<span Courier New"">перенести наутренние часы.
<span Courier New""> Пыльца деревьев: ива, ольха, тополь, лещина, береза,дуб,
<span Courier New""> клен, ясень, рябина, вяз,липа, ильм.
<span Courier New""> Пыльца хвойных деревьев: сосна, лиственница, ель, пихта,
<span Courier New""> кедр.
<span Courier New""> Пыльца злаков: овес, рожь, пшеница, пырей, рис, овсянница,
<span Courier New""> ежа, амброзия, тимофеевка,мятлик; загряз-
<span Courier New"">няющие зернопродукты животного, токсического,химического ха-
<span Courier New"">рактера (аллергияна пшеничную или овсяную муку).
<span Courier New""> Растения, вызывающие фитодерматозы: крапива,середка тополя,
<span Courier New""> волчье лыко, одуванчик, марь, паслен, ле-
<span Courier New""> беда, полынь. /7538/91/
<span Courier New""> Аллергены цитрусовых — какие-тобелковые компоненты кожуры
<span Courier New"">мандарин,лимонов, апельсин.
<span Courier New""> Лук, клубника, малина, земляника, соя ...
<span Courier New""> Чай, кофе, шоколад.
<span Courier New""> Ваниль, горчица, гвоздика, миндаль, корица, мускатный орех,
<span Courier New"">чеснок,сельдерей, перец.
<span Courier New"">
<span Courier New""> 32) Животного происхождения
<span Courier New""> — кожный эпителий животных (перья и пухптиц, «шерсть» жи-
<span Courier New"">вотных — пуховыеи шерстяные изделия)
<span Courier New""> — корм для аквариумных рыбок (сухие рачки идафнии)
<span Courier New""> — экстракт тараканов
<span Courier New""> — морские продукты, особенно богатые иодом
<span Courier New""> — мед, яйца, рыба и икра, свинина, куриное мясо,
<span Courier New""> — молоко (альфа-лактальбумин, казеин) — 7% аллергийу детей;
<span Courier New"">У кипяченого молока аллергические свойства резко падают(меня-
<span Courier New"">ется структурабелков). Молоко заменяют кефиром, творогом и пр.
<span Courier New"">Сыр.
<span Courier New""> — яды насекомых
<span Courier New""> — препараты крови, лечебные сыворотки.
<span Courier New"">
<span Courier New""> 33) 1 3микробногопроисхождения
<span Courier New""> — Некоторые АГ пневмококков, стафилококков,стрептококков,
<span Courier New""> — АГ дрожжей /аллергия на хлеб/,
<span Courier New""> — АГ спор плесневых грибов — ГП (М. более 40кД),
<span Courier New""> — АГ паразитов
<span Courier New""> — АГ вакцин
<span Courier New""> — Антибиотики
<span Courier New"">
<span Courier New""> 34) химического происхождения
<span Courier New""> — краски, лаки, моющие средства, косметика (только 20% кос-
<span Courier New"">метическихсредств безопасны в отношении аллергии /1652к/),
<span Courier New""> — лекарственные препараты(сульфаниламиды, новокаин, дикаин
<span Courier New"">и др.анальгетики, анестетики /аспирин, анальгин/), [анальгети-
<span Courier New"">ки — блокируютболевую чувствительность; анестетики — подавляют
<span Courier New"">любой видчувствительности]
<span Courier New""> — отходы химического производства /профессиональные болез-
<span Courier New"">ни/,
<span Courier New""> — рентгеноконтрастные вещества
<span Courier New""> — дезинфецирующие средства и пр.
<span Courier New"">[5) физическогопроисхождения (см. эндоаллергены).]
<span Courier New"">
<span Courier New"">6) Промышленная,бытовая и библиотечная 3пыль 0.
<span Courier New""> — клещ домашней пыли
<span Courier New"">
<span Courier New""> Проба на аллергены: за рубежом накладываютманжету на предп-
<span Courier New"">лечье с 40 ячейками, в каждой их которых один из основных ал-
<span Courier New"">лергенов. Через1-2 сут оценивается зона покраснения и соот-
<span Courier New"">ветствующаяячейка. (У пожилых лиц пробы чаще отрицательные.)
<span Courier New"">
<span Courier New"">.
<span Courier New"">
<span Courier New""> 3АНТИТЕЛО-СОДЕРЖАЩИЕБИОПРЕПАРАТЫ
<span Courier New""> (вызывают пассивный иммунитет)
<span Courier New"">
<span Courier New""> АТ-содержащие биопрепараты включают антимикробныеили анти-
<span Courier New"">токсические АТ ииспользуются для лечения или диагностики. Ан-
<span Courier New"">тисывороткииспользуют по жизненным показаниям с целью экстрен-
<span Courier New"">нойсеропрофилактики (при непосредственной угрозе заболевания).
<span Courier New"">
<span Courier New""> 1) Кровь, плазма (переливание). Сыворотки. _Антисыворотки ..
<span Courier New""> 2) _Гамма-глобулины .(общие, направленного действия, получае-
<span Courier New"">мые либо послеиммунизации, либо от лица, недавно перенесшего
<span Courier New"">заболевание).
<span Courier New""> 3) _МАТ . (пока только мышиные,человеческие гибридомы в насто-
<span Courier New"">ящее времяотсутствуют).
<span Courier New""> 14) Иммунное молоко. Сочетаниепарентеральной и диалетической
<span Courier New""> 1иммунизациипозволило получить _иммунное молоко ., содержащее ан-
<span Courier New""> 1титела квибрионам холеры и токсину, ЭПКП, протеям, шигеллам
<span Courier New""> 1Зонне. В настоящее время наметились 2 тенденции в технологии
<span Courier New""> 1изготовленияпрепаратов иммунного молока — получение _лактосыво-
<span Courier New""> _ 1ротокили лактоглобулинов … Лактосыворотка, в отличие от лактог-
<span Courier New""> 1лобулина, обладает большей буферной емкостью, содержитингиби-
<span Courier New""> 1торытрипсина и химотрипсина, что в известной степени обеспечи-
<span Courier New""> 1вает устойчивость белков коровьего молока кдействию ферментов
<span Courier New""> 1ЖКТ. Кроме того, некоторые белки лактосыворотки(лактоперокси-
<span Courier New""> 1даза,лактоферрин, лизоцим и др.) оказывают неспецифическое ан-
<span Courier New""> 1тимикробноедействие и способы потенцировать защитный эффект
<span Courier New""> 1специфическихантител. /2114к/87/ — (ПОВТОР материала по ОКИ)
<span Courier New""> _Получение антисыворотки из молока
<span Courier New""> 4Молозиво центрифугируют при 20000 об./мин. 2 часа при 4 50 4С,
<span Courier New""> 4липидныйслой отделяют (обезжиривание). Казеиносаждают титро-
<span Courier New""> 4ванием 1Нуксусной кислотой до рН 4,6 с последующим центрифуги-
<span Courier New""> 4рованием втех же условиях. Используют надосадок,который диа-
<span Courier New""> 4лизируют в0,01М растворе фосфатного буфера с рН 7,0. Для выде-
<span Courier New""> 4ленияочищенной фракции Ig A можно использовать ионообменную
<span Courier New""> 4хроматографию(ИОХ) на ДЭАЭ-целлюлозе. /6737/ 0
<span Courier New""> 5) Антиидиотипические АТ используют для запуска активного
<span Courier New"">иммунитета,поэтому называют антиидиотипическими вакцинами 4(см.
<span Courier New""> 4материалпо вакцинам) 0
<span Courier New"">
<span Courier New""> _ 2Получение 0АТ .-содержащих препаратов
<span Courier New""> I. От иммунизированных животных
<span Courier New""> II. Из крови иммунных лиц (недавновыздоровевших)
<span Courier New"">
<span Courier New""> _Иммунизацияживотных
<span Courier New""> ┌────────────────────┴─────────────────────┐
<span Courier New""> селезенка мыши Кровь
<span Courier New""> │ │
<span Courier New""> выделение Ретракциясгустка
<span Courier New""> ПК, синтезирующих (40 минут, 37 5о 0С)
<span Courier New""> искомые АТ │
<span Courier New""> │ Сыворотка
<span Courier New""> ПК+ (В-лимфоцит, (=антисыворотка)
<span Courier New""> инфицированный ВЭБ │
<span Courier New""> — лимфомная клетка) (Высаливание,
<span Courier New""> + ПЭГ спиртовоеосаждение,
<span Courier New""> │ адсорбция)
<span Courier New""> Гибридома — активация │
<span Courier New""> │ клеток Гамма-фракция
<span Courier New""> МАТ │ иммуноглобулинов
<span Courier New""> ИФ, ФНО, ИЛ │
<span Courier New""> в питательной Аффинная хромато-
<span Courier New""> среде графия (сорбция
<span Courier New""> │ на комплекс «АГ-
<span Courier New»"> │ носитель"
<span Courier New""> Реакция на │
<span Courier New""> «примеси» Моновалентные АТ
<span Courier New"">
<span Courier New"">
<span Courier New""> 31. Иммунизация
<span Courier New""> Первая иммунизация вызывает первичный ИО;вторая и последую-
<span Courier New"">щие — вторичныйИО. Многократную иммунизациюназывают гипе-
<span Courier New"">риммунизацией(--- гипериммунная сыворотка).
<span Courier New""> Способы иммунизации животных:
<span Courier New""> 2- в/кож. 0 (объем до 100 мкл)--- региональные ЛУ
<span Courier New""> 2- п/кож. 0 (объем 1-30 мкл). При данном способе иммунизации
<span Courier New"">антигенраспространяется медленно, т.к.подкожная клетчатка не
<span Courier New"">имеет развитыхлимфатических протоков.
<span Courier New""> 2- в/мыш. 0 (0,5-8мл соответственно для мышей-кроликов) в об-
<span Courier New"">ласть бедра;птицам в грудную мышцу.
<span Courier New""> 2- в/бр. 0 (2-30мл соответственнодля мышей-кроликов); при этом
<span Courier New"">животноеопускается головой вниз;
<span Courier New""> 2- в/в 0 (1-10мл); если в боковую вену хвоста, то хвост предва-
<span Courier New"">рительноопускается в стакан с горячей водой -55 5о 0С;
<span Courier New""> 2- интраназально 0 (по каплям от 0,03 до 1 млсоответственно
<span Courier New"">длямышей-кроликов);
<span Courier New""> 2- оральное введение 0 (0,3-5мл): антиген смешивают с кормом и
<span Courier New"">скармливают или ввиде питья, можно через зонд — в желудок.
<span Courier New"">/7143/89/1
<span Courier New""> — 2per rectum 0
<span Courier New""> 5Пример:
<span Courier New""> 5Один объем антигена смешивают с 3объемами полного адъюванта
<span Courier New""> 5Фрейнда итщательно перемешивают. Полученную эмульсию вводят
<span Courier New""> 5внутрикожнопо 0,1мл в 10 точек спины, расположенных по 5 в ряд
<span Courier New""> 5нарасстоянии 2 см по обе стороны от позвоночника. Общая доза
<span Courier New""> 5иммуногенаравна 10-100 мкг на кролика. Иммунизируют 6 кроликов
<span Courier New""> 5массой по2 кг. Через 8-10 недель проводят пробноекровопуска-
<span Courier New""> 5ние. При удовлетворительном качестве антисыворотки последова-
<span Courier New""> 5тельнопроводят до 3 кровопусканий, послечего кроликам дают
<span Courier New""> 5отдохнутьв течение 1 месяца и затем делают следующие кровопус-
<span Courier New""> 5кания. Принеудовлетворительном качестве антисыворотки проводят
<span Courier New""> 5вторичную иммунизацию, используя половинную дозу иммуногена в
<span Courier New""> 5неполномадъюванте Фрейнда. Иммунизируют подкожно в складку ко-
<span Courier New""> 5жи нашее. Через 10 суток делают пробноекровопускание и опре-
<span Courier New""> 5деляюткачество антисыворотки. При неудовлетворительном качест-
<span Courier New""> 5ве индивидуальной антисыворотки иммунизируютновую группу кро-
<span Courier New""> 5ликов илиживотных другого вида. /6817/84/ 0
<span Courier New""> 32. Получение крови и сыворотки
<span Courier New""> У животных или иммунизированного человекаберут кровь в пус-
<span Courier New"">тые пробирки, после ее свертывания откручивают на центрифуге,
<span Courier New"">получаетсят.н. антисыворотка, из которой можно выделить гам-
<span Courier New"">ма-глобулиновуюфракцию.
<span Courier New""> Противоэнцефалитный иммуноглобулин получалииз сывороток лю-
<span Courier New"">дей, проживающихв местах распространения данного заболевания,
<span Courier New"">содержащихдостаточно высокий уровень специфическихпротивови-
<span Courier New"">русных антител./1430к/
<span Courier New""> 32. 2О 3чистка 0( 3фракционирование 0) и тестирование
<span Courier New""> — Осаждение
<span Courier New""> — высаливанием (осаждение сульфатом натрия или сульфатом
<span Courier New""> аммония)
<span Courier New""> — осаждение спиртом
<span Courier New""> — полиэтиленгликолем (ПЭГ)
<span Courier New""> — каприловой кислотой
<span Courier New""> — ферментирование
<span Courier New""> — диализ
<span Courier New""> — адсорбция
<span Courier New""> — аффинной хроматографией
<span Courier New""> — выделение на белок А-сефарозе (FcRзолотистого стафило-
<span Courier New""> кокка)
<span Courier New"">
<span Courier New""> Силу антитоксических сывороток измеряют вмеждународных еди-
<span Courier New"">ницах (МЕ) поспособности нейтрализовать определенную дозу ток-
<span Courier New"">сина.
<span Courier New"">
<span Courier New""> _Антисыворотки
<span Courier New"">
<span Courier New""> — Лечебные │ (используется только по
<span Courier New""> — Профилактические │ жизненным показаниям)
<span Courier New""> — Диагностические
<span Courier New"">
<span Courier New""> По специфичности различают
<span Courier New"">- моновалентнуюантисыворотку
<span Courier New"">- поливалентнуюантисыворотку
<span Courier New"">- антицельнуюантисыворотку (против всех сывороточных белков -
<span Courier New""> 36)
<span Courier New"">
<span Courier New""> _Недостатки антисывороток .:
<span Courier New""> — Выделенная из крови сыворотка, сколько бы ее не очищали и
<span Courier New"">ни концентрировали, содержит набор различных антител. Поэтому
<span Courier New"">ее называютполиклональной. Лишь _небольшаячасть антител . нап-
<span Courier New"">равлена _против специфичных антигенных детерминант ..
<span Courier New""> — Иммуноглобулины антисывороток уже соткрытыми углеводными
<span Courier New"">компонентами,поэтому _быстрее выводятся из организма ..
<span Courier New""> — Углеводные компоненты, переплетаясь между собой, приводят
<span Courier New"">к спонтанной _агрегации белков . при длительном хранении, что спо-
<span Courier New"">собствует вкровотоке закупорке некоторого количества капилля-
<span Courier New"">ров и активациисистемы комплемента по альтернативному пути.
<span Courier New""> — " _Примесные АТ ."дают многочисленные «перекрестные» положи-
<span Courier New"">тельныереакции, которые приводят к ошибочнымдиагнозам по се-
<span Courier New"">родиагностике.
<span Courier New""> — " _Примесные АГ .".Иные белки сыворотки могут содержать раст-
<span Courier New"">воримые(сброшенные) антигены HLA, АВ, Rh, иныеаллотипы анти-
<span Courier New"">тел и др., чтоиммунизирует реципиента.
<span Courier New""> — Ксеногенные (лошадиные) сыворотки приповторном введении в
<span Courier New"">организм могутвызывать _аллергические реакции . на чужеродный бе-
<span Courier New"">лок. Поэтому необходима постановка _внутрикожной пробы . с сыво-
<span Courier New"">роткой вразведении 1:100 в объеме 0,1 мл. Введение антитокси-
<span Courier New"">ческой лошадинойсыворотки допустимо лишь в случае отсутствия
<span Courier New"">выраженной кожнойреакции в течение 20-30 минут. /1430к/
<span Courier New""> — Ещеодин серьезный недостаток: для полученияантител каж-
<span Courier New"">дый разнеобходимо _заново иммунизировать . животных и очищать вы-
<span Courier New"">деленнуюсыворотку. Это стоит немалых денег.
<span Courier New"">
<span Courier New"">
<span Courier New""> _Гамма-глобулины(преимущественно Ig G)
<span Courier New"">
<span Courier New""> Содержание антител в препаратахиммуноглобулинов человека:
<span Courier New""> — АТ к токсинам (дифтерийному, столбнячному,пертуссигену)
<span Courier New""> — Титры агглютинирующих АТ к штаммамвозбудителей располага-
<span Courier New"">ются в следующемпорядке (по убыванию)
<span Courier New""> — P. aeruqinosa
<span Courier New""> — S. sanguis,
<span Courier New""> — B.melaninogenicus,
<span Courier New""> — B. bronchisrptica,
<span Courier New""> — Veillonella,
<span Courier New""> — E. coli.
<span Courier New""> Титры к E.c. очень низкие. /2384к/84/
<span Courier New"">
<span Courier New""> Использование иммуноглобулинов
<span Courier New""> для пассивной иммунизации/7330/87/
<span Courier New"">────────────────────┬─────────────────────┬────────────────────
<span Courier New""> Пулированные │ Специфические │ Специфические
<span Courier New""> Ig человека │ Ig человека │ лошадиные Ig
<span Courier New"">────────────────────┴─────────────────────┴────────────────────
<span Courier New"">ГуморальныйИД Гепатит В Ботулинум токсин
<span Courier New"">Гепатит А Бешенство Дифтерийный токсин
<span Courier New"">Корь Столбняк Змеиный яд
<span Courier New""> Ветряная оспа Яд паука
<span Courier New""> Натуральная оспа Black widow
<span Courier New""> (коровья оспа)
<span Courier New""> Rh изоиммунизация
<span Courier New""> pertussis
<span Courier New"">───────────────────────────────────────────────────────────────
<span Courier New"">
<span Courier New"">
<span Courier New""> 2МАТ
<span Courier New"">
<span Courier New""> 2МАТ (моноклональные ант