Реферат: Класс жгутиковые: лейшмании, трихомонады, лямблии, трипаносомы

САМАРСКИЙГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ

Курсоваяработа

Тема:«Классжгутиковые: лейшмании, трихомонады, лямблии, трипаносомы.»

Исполнитель:

студентка I  курса

факультета

сверхнормативного

 образования

Баринова Ю.Ю.

 

Проверил:

Аршина С.Г.

Сызрань2000 год


План

I. Общая характеристика простейших.

II. Класс жгутиков.

III.Лейшмании:

1. Виды

2. Строение

3. Цикл развития

4. Источники инфекции

5. Клиника

6. Диагностика

7. Профилактика

IV.Трипаносомы:

1. Строение

2. Жизненный цикл

3. Клиника

4. Диагностика

V.Лямблии:

1. Строение

2. Цикл развития

3. Клиника

4. Диагностика

VI.Трихомонады:

1. Виды

2. Строение

3. Клиника

4. Диагностика


 Простейшие

Многочисленные видыодноклеточных организмов по современной зоологической классификации относятся кподцарству простейших. Часть из них ведет паразитический образ жизни.

Тело простейших состоит изцитоплазмы, ядра, различных органелл, обеспечивающих функции питания, движения,выделения. Простейшие передвигаются с помощью псевдоподий (саркодовые),жгутиков и ундулирующих мембран (жгутиконосцы), ресничек (ресничные инфузории).Пищей одноклеточным служат органические частицы, в том числе и живыемикроорганизмы, а также растворенные в окружающей среде питательные вещества.

Простейшие некоторых видовспособны инцистироваться, т. е. они округляются и покрываются плотнойоболочкой. Цисты более устойчивы к воздействию неблагоприятных внешнихфакторов, чем вегетативные формы. При попадании в благоприятные условияпростейшие выходят из цисты и начинают размножаться. Размножение происходитбесполым (поперечное, продольное и множественное деление) и половым путем.Простейшие многих видов, ведущие паразитический образ жизни, размножаютсяпоследовательно в нескольких хозяевах. Например, малярийный плазмодий проходитцикл развития в теле комара и в организме человека. Простейшие, обитающие ворганизме человека, относятся к четырем классам: саркодовые; жгутиконосцы;споровики, ресничные инфузории.

Классы подразделяются на отряды, семейства, роды (схема1). Последние включают один или несколько видов.

/>


КЛАСС

ЖГУТИКОНОСЦЫ (МАSТ1G0РНОRА)

Основное отличиепростейших этого класса — наличие на одной из стадий развития одного илинескольких жгутиков. В теле жгутиконосцев у основания жгута имеется особыйорганоид—кинетопласт, функция которого связана с выработкой энергии длядвижения жгута. У некоторых жгутиконосцев один из жгутиков проходит вдоль телаи соединён с ним тонкой перепонкой, образуя волнообразную (ундулирующую)мембрану. Последняя обеспечивает поступательное движение простейшего.

Из многочисленных видов данногокласса для человека имеют наибольшее патогенное значение лейшманий итрипаносомы. Передаются они человеку через кровососущих переносчиков (москиты,мухи це-це и др.). Другие представители класса жгутиконосцев —• лямблии —обитают в кишечнике, а различные виды трихомонад — в кишечнике, ротовой полостии мочеполовых путях. Распространены эти простейшие очень широко.

Лейшмании

Виды.

Различают три вида лейшманий,паразитирующих у человека.Leishmaniatropica вызывает у человека кожныйлейшманиоз. Этот паразит был впервые обнаружен русским врачом и ученым П. Ф.Боровским (1897).

Выделяют две формы кожноголейшманиоза — антропонозную (городскую) и зоонозную (пустынную). Leishmaniabrasiliesis встречается в Южной Америке ивызывает кожно-слизистый (американский) лейшманиоэ.Leishmaniadonovaniпоражает внутренние органы,поэтому заболевание называется висцеральным (внутренним) лейшманиозом.Лейшмании этого вида названы по имени английских ученых, впервые обнаружившихих в селезенке больных людей в Индии [Лейшман (1900) и Донован (1903)].Различают две основные географические формы: средиземноморский висцеральныйлейшманиоз, встречающийся также и в СССР, и индийский кала-азар.

Строение.

Лейшмании в своем развитиипроходят две стадии. Безжгутиковая форма имеет овальное тело длиной 2—6 мкм.Ядро округлое, занимает до 1/3  клетки. Рядом с ним находится кинетопласт,имеющий вид короткой палочки.

При окраске по Романовскомуцитоплазма серовато-голубая, голубая или голубовато-сиреневая, ядро —красно-фиолетовое, кинетопласт окрашивается более интенсивно, чем ядро (рис.1).

/>

Рис. № 1 Leishmaniadonovani(А) 1 лейшманиясвободнолежащая, 2 лейшмании внутриклеточные, 3 эритроцит, 4 нормобласт, 5промиелоцит. Leishmaniatropika(Б) 1 лейшмания свободнолежащая, 2 лейшмании внутриклеточные,3 эритроцит, 4 нейтрофил, 5 лимфоцит..

Лейшмании на этой стадиинеподвижны, жгутиков не имеют. Встречаются в теле позвоночного хозяина(человек, собаки, грызуны), паразитируют внутриклеточно в макрофагах, клеткахкостного мозга, селезенки, печени. В одной пораженной клетке может содержатьсядо нескольких десятков лейшманий. Размножаются простым делением.

Жгутиковая форма подвижная,имеет жгутик длиной 15—20 мкм. Форма тела удлиненная, веретенообразная, длинойдо 10—20 мкм. Деление продольное. Развивается в теле беспозвоночного хозяина —переносчика (москита). В культуре на питательных средах также развиваютсяжгутиковые формы лейшманий.

Цикл развития.

Паразитируя в организме человекаи некоторых животных, могут находиться в крови и коже. Москиты, мелкиенасекомые, насосавшись крови больных людей или животных, заражаютсялейшманиями.

Впервые же сутки заглоченныебезжгутиковые паразиты превращаются в подвижные жгутиковые формы, начинаютразмножаться и спустя 6—8 дней скапливаются в глотке москита.

При укусе человека зараженным москитом подвижные формылейшманий из его глотки проникают в ранку и затем внедряются в клетки кожи иливнутренних органов в зависимости от вида лейшманий. Здесь происходит ихпревращение в безжгутиковые формы.            . />

           Рис № 2 Собака, пораженная висцеральнымлейшманиозом.

Источники инфекции.

На возможную роль собак как источника инфекции присредиземноморском висцеральном лейшманиозе впервые указал французский ученый Ш.Николь, а подтвердили это советские ученые Н. И. Ходукин и М. С. Софиев. Кромесобак, источником инфекции могут быть и некоторые дикие животные (шакалы,дикообразы, лисицы). При индийском лейшманиозе (кала-азаре) источником инфекцииявляются больные люди.

У собаки, пораженнойвисцеральным лейшманиозом (рис. 2), развивается истощение, появляются язвы наголове и коже тела, шелушение кожи, особенно вокруг глаз. При этом важноучитывать, что если у молодых собак заболевание может протекать остро и дажеприводить их к гибели, то у взрослых животных течение болезни нередко болеестертое или даже бессимптомное (носительство).

В СНГ висцеральный лейшманиозвстречается спорадически в Средней Азии, на юге Казахстана и в Закавказье.

При кожном лейшманиозе источником инфекции являютсябольные люди  или, как это впервые показал в 1937—1940 гг. Н. И. Латышев, дикиегрызуны (при зоонозной форме, “пендинской язве”). Основными хранителямилейшманий являются большая песчанка (рис. 3) и краснохвостая песчанка.Зоонозный кожный лейшманиоз встречается во многих оазисах южной части Туркмениии Узбекистане. Передача этого лейшманиоза иногда идет столь интенсивно, чтоместные жители переболевают им еще в дошкольном возрасте. Жизненные циклылейшманий представлены на рис. 4 и 5

/>

Рис. № 3. Большая песчанка.

/>

Рис № 4 Жизненный цикл Leishmania donovani

/>

Рис № 5 Жизненный цикл Leishmania  tropika

 Клиника.

Висцеральным лейшманиозом чащезаболевают дети. После инкубационного периода длительностью от несколькихнедель до нескольких месяцев у заболевшего повышается температура тела, вразгаре болезни достигающая 39—40°С, появляется вялость, адинамия, бледность,исчезает аппетит, увеличивается, иногда резко, селезенка  и печень, вследствиечего заметно выступает живот (рис.№ 6)

 />

           Рис № 6 Ребенок, больной висцеральнымлейшманиозом.

Развиваются анемия и истощениебольного.

Заболевание тянется несколькомесяцев и при отсутствии лечения обычно заканчивается смертью, непосредственнойпричиной которой часто являются такие осложнения, как пневмония, диспепсия.

При заражении человека возбудителемкожного лейшманиоза после инкубационного периода от 1— 2 нед до несколькихмесяцев (при зоонозном типе этот пери­од обычно короткий) в местах укусовмоскитов появляются небольшие бугорки. Они буровато-красноватого цвета, среднейплотности, обычно малоболезненные. Бугорки постепенно увеличиваются и затемизъязвляются — через 3— 6 нед при антропонозной форме и через 1—3 нед призоонозной. Возникают язвы с отеком окружающей ткани, вос­палением и увеличениемлимфатических узлов.

Процесс тянется несколько месяцев(при антропонозной форме—больше года), заканчиваясь выздоровлением. На местеязв остаются рубцы. После перенесенного заболе­вания формируется стойкийиммунитет.

Диагностика.

 При постановке клиническогодиагноза указанные выше основные симптомы заболевания являются опорными.Следует учитывать эпидемиологические данные

(проживание в неблагополучных по лейшманиозу местах ит.д.). Окончательный и достоверный диагноз висцерального лейшманиоза ставитсяна основании обнаружения возбудителя.

Исследование пунктата костного мозга

С целью обнаружения возбудителявисцерального лейшманиоза, а в ряде случаев и других простейших исследуюткостный мозг.

Костный мозг получают, пунктируягребень подвздошной, головку большеберцовой кости или грудину. Во всех случаяхпункция является ответственной процедурой и производится только врачом.

Полученный при пункции костныймозг помещают на предметное стекло и, осторожно размазывая тонким слоем спомощью шлифованного стекла, готовят мазок. При значи­тельной примеси крови впунктате на стекле находят маленькие белые комочки и готовят из них мазки.

Фиксация мазка. Мазок сушат на воздухе,фиксируют 30 мин в абсолютном этиловом спирте или 5 мин в метаноле (метиловомспирте), снова высушивают на воздухе. Фиксированные мазки можно хранить доокраски несколько дней.

Окраска мазка. Стекла укладывают мазкамикверху на стеклянные палочки в фотокювете. На всю поверхность мазка наливаютразведенную в фосфатном буфере (рН 6,9—7,1) краску Романовского на 30—50 мин.Продолжительность окраски зависит от температуры помещения — в теплом онаменьше, в холодном — больше. После окраски препарат ополаскиваютдистиллированной водой (или кипяченой) и высушивают. Исследуют под иммерсией.

Оценка результатов. В разгаре болезни лейшманиимогут обнаруживаться легко. В ранней стадии и в период лечения требуется болеедлительный просмотр мазка — не менее 40 мин.

В препаратах лейшманий могутнаходиться группами или поодиночке, как внутриклеточно, так и вне клеток всвязи с разрушением их во время приготовления мазка.

При кожном лейшманиозе исследуют мазки из не распавшихсябугорков или из инфильтратов вблизи язв.

Пункция кожных поражений илимфатических узлов.

При некоторых болезняхпротозойной этиологии, например, кожном лейшманиозе, исследуют материал из кожныхпоражений, а в ряде случаев исследуют пунктат лимфатических узлов (лейшманиоз,трипаносомоз, токсоплазмоз).

При кожном лейшманиозе мазкиготовят из не распавшихся бугорков и язв. Кожу в области бугорка протираютспиртом, двумя пальцами слегка сдавливают и иглой или кончиком скальпеля делаютпрокол или поверхностный надрез. Из выступившей серозно-кровянистой жидкостиготовят на предметном стекле мазок.

При наличии язв материал братьнепосредственно из них не рекомендуется, так как наличие микрофлоры и остатковразрушенных клеток затрудняет поиски лейшманий. Поэтому после предварительнойобработки кожи спиртом область вокруг язвы сжимают двумя пальцами и в зонеинфильтрата по краю язвы делают прокол иглой или поверхностный разрезскальпелем. Для приготовления мазков используют каплю серозно-кровянистойжидкости или полученный при поскабливании скальпелем по краю разреза материал.

Мазки сушат на воздухе,фиксируют смесью Никифорова и красят по Романовскому.

Оценка результатов. В препарате должны быть хорошоразличимы клетки инфильтрата — макрофаги, эндотелиальные, плазматические,лимфоидные клетки, фибробласты и небольшая примесь клеток периферической крови.Наличие в препарате эпителиальных клеток, бесструктурных глыбок, окрашивающихсяв равномерно сиреневый цвет, означает, что соскоб был взят поверхностно идолжен быть повторен. В мазке не должно быть слишком много крови, а также гнояи бактерий.

Лейшмании обнаруживаются вмакрофагах, а также вне клеток в виде округлых, овальных или удлиненных телецразмером 3—5 мкм.

Лейшмании легко обнаруживаются на начальных стадияхизъязвления. В гнойном отделяемом язвы могут быть обнаружены лишьдеформированные и разрушающиеся лейшмании, по которым трудно поставить диагноз.На стадии заживления обнаруживаются редко.

Пункция увеличенныхлимфатических узлов обычно проводится врачом с помощью инъекционной иглы послесоответствующей обработки кожи. Узел придерживают рукой, содержимое через иглунасасывают шприцем и наносят на предметное стекло.

 В ряде случаев применяют метод посева кровибольного или материала из кожных поражений или костного мозга на среду, котораяготовится из агара с добавлением дефибринированной крови кролика. Вположительном случае на 2— 10-й день в культуре появляются жгутиковые формылейшманий.

 

Профилактика.

 

          Профилактические мероприятия выбираютсяприменительно к виду лейшманиоза. При лейшманиозе проводят подворные обходы дляраннего выявления больных, организуют систематическое уничтожение безнадзорныхсобак и осмотры зарегистрированных собак ценных пород (охотничьи, сторожевые,служебные и т.д.). При антропонозной форме кожного лейшманиоза основнымпрофилактическим мероприятием является выявление и лечение больных людей. Призоонозной форме организуют истребление диких грызунов.

Надежным средством индивидуальнойпрофилактики являются прививки живой культуры жгутиковых форм. Важным разделомборьбы против всех видов лейшманиоза служит уничтожение москитов ипредохранение людей от их укусов.

Трипаносомы

 

Строение.

 

 Для человека патогенны три видаиз рода Trypanosoma, причем два вида вызываютафриканский трипаносомоз (сонную болезнь) и один вид —американский трипаносомоз (болезнь Шагаса).

Тело трипаносом продолговатое,узкое, имеет жгутики и ундулирующую мембрану. Длина тела 17—28 мкм.Переносчиком возбудителей африканского трипаносомоза являются мухи рода Glossina, или це-це (рис.№  7 и 8  ).

/>

Рис. № 7 Жизненный цикл Trypanosoma rhodesiense

 />

Рис № 8 Жизненный цикл  Tripanosoma  gambiense

Болезнь Шагаса переноситсятриатомовыми клопами (рис. 9).

/>

Рис №    Жизненный цикл Trypanosoma cruzi

 

Клиника.

При нападении на человека зараженного переносчикатрипаносомы проникают в кровь, затем — во внутренние органы и центральнуюнервную систему, где и размножаются. У больных повышается температура тела, появляетсясыпь на теле, увеличиваются лимфатические узлы.

При сонной болезни поражаетсяцентральная нервная система, развивается менингоэнцефалит, обычно приводящийбольного к гибели по истечении нескольких месяцев или лет.

Болезнь Шагаса — тяжелоезаболевание, поражающее внутренние ор­ганы, сердечную мышцу, головной мозг. ВСНГ могут выявляться только завозные случаи трипаносомозов.

Диагностика.

При африканском трипаносомозепаразитологическое исследование имеет свои особенности, зависящие от стадиизаболевания. Возбудителя можно обнаружить в начальном периоде заболевания наместе укуса зараженной мухой це-це, а также в периферической крови. В позднийпериод лихорадки или по окончании его трипаносом обнаруживают в пунктате увеличенных лимфатических узлов. В периодпроявления симптомов поражения центральной нервной системы паразитов, в крови ив лимфатических узлах нет. На этой стадии болезни более эффективно исследованиеспинномозговой жидкости.

/>

Для обнаружения трипаносомисследуют свежие или окрашенные препараты. В первом случае каплю крови,смешанную с цитратом, пунктат лимфатического узла или спинномозговой жидкостипомещают на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и микроскопируют.Подвижных трипаносом можно заметить даже при малом увеличении микроскопа, хотялучше их видно при большом увеличении. Более распространенным являетсяисследование постоянных окрашенных по Романовскому препаратов, для чего готовятмазки и толстые капли обычным способом. В окрашенных препаратах трипаносомылегко распознаются среди клеточных элементов. При окраске по Романовскому тело трипаносом окрашивается в голубоватый цвет,ядро и жгуты— в красный. На препарате можно видеть мембрану, соединяющуюволнообразно извитой жгутик с краем тела.

Если в свежих или окрашенных препаратахне удается обнаружить возбудителя, используют метод заражения лабораторныхживотных. Наиболее чувствительны к заражению трипаносомами белые мыши, укоторых после введения исследуемого материала подкожно или внутримышечно уже на2—3-й день в крови появляются паразиты.

При американском трипаносомозе возбудительобнаруживается в острой стадии болезни в периферической крови в свежих илиокрашенных по Романовскому препаратах. Однако по сравнению с африканской формойболезни число трипаносом здесь значительно меньше, поэтому требуетсяпросматривать большое число препаратов. В хронической стадии паразиты в кровивстречаются очень редко, поэтому исследование периферической крови бываетмалоэффективным. В таких случаях рекомендуется заражение белых мышей или морскихсвинок, а также посевы на питательные среды. С целью диагностики используютсерологические реакции: связывания комплемента, агглютинации, флюоресцирующихантител.

Лямблии

Строение.

Лямблия (Lamblia intestinalis) впервые была описана русскимученым Д. Ф. Лямблем (1859), в честь которого она и получила свое название.

Лямблия существует в виде вегетативной формы (трофозоит)и цисты (рис. 10).

 Вегетативная форма активная, подвижная, грушевидная,передний конец тела закруглен, задний заострен. Длина 9—18 мкм. В переднейчасти тела находится присасывательный диск в виде углубления. Имеет 2 ядра, 4пары жгутиков. Жгутики, проходя частично в цитоплазме, образуют два хорошовидимых при окраске продольных пучка.

/>

          Рис № 10 Лямблии

При наблюдениив живом состоянии движение очень ха­рактерное, паразит все времяпереворачивается боком за счет вращательного движения вокруг продольной оси. Впрепарате при комнатной температуре лямблии быстро погибают. Пищу всасываютвсей поверхностью. Размно­жаются продольным делением.

Цисты — это неподвижные неактивные формы паразита. Длина10—14 мкм. Форма овальная. Оболочка сравнитель­но толстая, хорошо очерчена,часто в значительной своей части как бы отслоена от тела самой цисты. Этотпризнак помогает отличать цисты лямблий от других сходных образований.

В растворе Люголя окрашиваются вжелтовато-коричневатый цвет. Окрашивание позволяет видеть в зрелой цисте 4ядра.

Цикл развития.

Обитают в верхнем отделе тонкогокишечника. С помощью присасывательного диска прикрепляются к ворсинкам. Вжелчном пузыре лямблий не живут, так как желчь на них действует губительно.Частое обнаружение их при дуоденальном зондировании объясняется тем, чтолямблий попадают в содержимое двенадцатиперстной кишки с ее стенок.

Обычно вегетативные формы с испражнениямине выделяются, однако при поносах их можно обнаружить в свежевыделенных жидкихфекалиях. Лямблий, попадая в нижние отделы кишечника, где условия для нихнеблагоприятные, превращаются в цисты, которые и выделяются обычно сиспражнениями.

Цисты хорошо сохраняются вовнешней среде, в зависи­мости от влажности и окружающей температуры — домесяца; при высушивании погибают очень быстро.

Заражение может произойти через загрязненные руки,игрушки, пищу и воду. Цисты, попадая в кишечник, превращаются там ввегетативные формы. Одна циста образует две вегетативные формы.

Клиника.

Лямблии распространены оченьшироко, особенно часто они встречаются у детей. По мнению некоторых ученых,лямблии, особенно при большом их числе, мо­гут вызывать механическое раздражениеслизистой оболочки кишечника, в определенной степени затруднять всасыва­ниежиров и жирорастворимых витаминов. При этом могут возникать нерезкие боли вживоте, расстройство стула, снижение аппетита, иногда боли в правом подреберье(лямблиоз). В некоторых случаях лямблии могут ухудшить течение другихзаболеваний кишечника и желчных путей. Ряд ученых считают лямблиинепатогенными. Таким образом, вопрос о патогенности лямблии в настоящее времяокончательно не решен.

Диагностика.

Обнаружитьлямблии у зараженного человека обычно сравнительно легко.

.

Исследованиежелчи.

Желчь и содержимоедвенадцатиперстной кишки, полученные при дуоденальном зондировании, осматриваюти выбирают комочки слизи на предметное стекло и микроскопируют. Кроме того,материал центрифугируют, просмат­ривают под микроскопом осадок. Этим методомможно обнаружить вегетативные стадии лямблий. В свежевыделенном  материале,полученном при дуоденальном зондировании, можно обнаружить подвижныевегетативные формы.

Исследование испражнений/

Сбор материала. Фекалии исследуют с цельюобнаружения простейших кишечника.

Движение простейших — одно из самых характерных иотличительных свойств, которое позволяет поставить правильный диагноз. Поэтомуосновное правило, которое необходимо неукоснительно выполнять — это подвергатьисследованию только свежий материал. Промежуток времени от момента выделения доисследования не должен превышать 30 мин., т. е. в лабораторию должныдоставляться фекалии в теплом виде. Под термином “теплые фекалии” надо пони­матьфекалии, не остывшие после выделения их из организма, но отнюдь не подогретыеискусственно. Исследование оформленных испражнений допускается в течение 2 чпосле выделения.

Исследуемый материал собирают вчистую сухую посуду. Наиболее подходящими для этой цели являются картонныепарафинированные стаканчики, которые после одноразового использования сжигают.Если фекалии собирают в стеклянную или фарфоровую посуду, то передупотреблением ее стерилизуют кипячением.

Вегетативные формы простейшихвесьма чувствительны к химическим веществам, и если в посуде, куда собирают:фекалии, остаются следы дезинфицирующих веществ, простейшие быстро погибают ираспознавание их стано­вится трудным, а иногда и невозможным.

Доставленный в лабораториюматериал прежде всего подвергают макроскопическому осмотру. При этом отмечаютконсистенцию кала, наличие слизи и крови. Если в лабораторию доставленоодновременно несколько проб фе­калий, в первую очередь подлежат исследованиюнеоформленные фекалии с патологическими примесями/

Сохранять пробу до исследованиянадо при обычной температуре в вытяжном шкафу. Помещать в термостат не следует,так как при повышенной температуре быстрее происходит размножение бактерий,больше образуется продуктов метаболизма, что приводит к быстрой дегенерации простейших.

При каждом анализе испражнений с целью обнаруженияпростейших кишечника обязательным является исследование нативного препарата имазка, окрашенного раствором Люголя.

Нативный мазок. Жидкие кровянисто-слизистыеиспражнения без видимой примеси фекальных масс могут быть исследованы бездобавления изотонического раствора хло­рида натрия. Деревянной палочкой каплюиспражнений переносят на предметное стекло и накрывают покровным стеклом.Пользоваться стеклянными палочками не рекомендуется, так как ими невозможнонабирать слизистые ко­мочки, в которых находятся простейшие. Правильноприготовленный препарат должен быть опрятным, покровное стекло должно плотноприлегать к предметному с равномерным распределением жидкости между стекламибез ее выступания за пределы покровного стекла. Мазок должен быть умереннойтолщины. Густой мазок малопрозрачен и его трудно микроскопировать, если жевзято слишком мало фекалий, то мазок получится разведенным и простейших можноне обнаружить. Через правильно приготовленный мазок должен быть виден печатныйтекст.

Микроскопическое исследованиесвежего мазка нужно проводить, обязательно соблюдая следующие правила:

1)         освещениепрепарата не должно быть ярким. Правильное освещение достигаетсясоответствующим положением кон­денсора, который опускают тем больше, чемсильнее источник света. Используют также светофильтр;

2)          препаратпро­сматривают сначала под малым увеличением микроскопа (X 10), а потом с сухойсистемой большого увеличения;

3)          передвигатьпрепарат надо с таким расчетом, чтобы не пропустить какие-либо участки мазкаили не попасть повторно на уже просмотренное место.

При правильном освещении дажепод малым увеличением можно увидеть вегетативные стадии и цисты лямблий. Послеориентировочного просмотра под малым увеличением обязательно применяют большоеувеличение (х10, х40).

Циста в нативном мазкеотличается от вегетативной стадии постоянной формой благодаря оболочке.Строение цист в нативном препарате плохо заметно, невидны ядра. Поэтому дляуточнения вида применяют мазок, окрашенный раствором 'Люголя.

Окраска раствором Люголя. Раствор Люголя поунифицированной методике рекомендуется следующего состава: йодид калия—3. г,кристаллический йод—'1,5 г, вода дистиллированная — 100 мл. Вначале растворяютйодид калия, затем йод. Раствор стабилен в темной склянке с притертой пробкойпри комнатной температуре не более месяца.

Цисты окрашиваются взолотисто-коричневый цвет. На фоне цитоплазмы заметны ядра, их строение ичисло. Хорошо виден гликоген, окрашивающийся в разные оттенки коричневогоцвета.

Методика просмотра препарата,окрашенного раствором Люголя, такая же, как и нативного мазка. Следуетучитывать, что при окраске раствором Люголя вегетативные стадии погибают иопределяются с трудом.

Так, если фекалии оформленные,то в нативном мазке при микроскопии ( х 400) обнаруживают цисты. Сочетаниеметодов копроскопии и дуоденального зондирования повышает частоту выявлениялямблиоза.

Следует отметить, что широкоераспространение лямблии (носительство) нередко вводит в заблуждение и вызываетгипердиагностику лямблиоза. Поэтому при наличии клинической картины пораженияжелудочно-кишечного тракта или желчных путей необходимо исключить другиевозможные причины заболевания, например провести бактериологическиеисследования.

Трихомонады.

Виды.

 У человека обитают три видатрихомонад (рис. 11):Trichomonas hominis— кишечная,обитающая в толстом кишечнике; Trichomonas tenax— ротовая,обитаю­щая в полости рта; Trichomonas vagimalis— влагалищная, паразитирующая в мочеполовых путях.

/>

Рис № 11. Трихомонады

а- трихомонада влагалищная, б-трихомонада кишечная, в- трихомонада ротовая.

Строение.

 Кишечная трихомонада имеетгрушевидное тело длиной 8—20 мкм. От переднего конца тела отходят обычно 5жгутиков.  С одной стороны тела по всей его длине расположена волнообразна;перепонка (ундулирующая мембрана), по наружному краю которой про ходит тонкаянить, выступающая своим свободным концом в виде жгутика. В цитоплазме приокраске видны ядро и осевая нить. Движение трихомонады активное, беспорядочное,“суетливое”.

Наряду с поступательным движением трихомонады вращаютсявокруг продольной оси. Мембрану удается заметить только при замедлении движениятрихомонады или при ее остановке в виде периодически пробегающих волн по однойиз сторон тела. Размножается делением. Цист не образует. Обитает в толстомкишечнике человека. В жидких испражнениях может обнаруживаться в очень большихколичествах. В ряде случаев играет определенную роль в развитии или ухудшениитечения заболеваний толстого кишечника, особенно у детей раннего возраста.

Ротовая трихомонада по строению похожа на кишечную,ее длина 6—13 мкм, ундулирующая мембрана не достигает конца тела. Цист необразует.

Патогенное значение не доказано,хотя и имеются данные о значительно более частой встречаемости у лиц сразличными заболеваниями полости рта и зубов (гингивит, пародонтоз, кариесзубов) и о неблагоприятной роли этих простейших в поддержании патологическогопроцесса. Некоторые исследователи обнаруживали трихомонад в мокроте больныхлегочными заболеваниями, а также в удаленных хирургическим путем бронхоэктазахи абсцессах легких. Все это заставляет обратить внимание на необходимость болееширокого применения лабораторных методов исследования с целью выявления ротовыхтрихомонад в стоматологических и терапевтических медицинских учреждениях.

Трихомонад обнаруживают примикроскопии нативных или окрашенных мазков из соскоба ротовой полости (с зубов,десен, из очагов вос­паления и нагноения), в бронхиальной слизи и мокроте.Выявляемость увеличивается с применением методов посева на питательные среды.

Влагалищная трихомонада имеетгрушевидное тело длиной 14—30 мкм (см. рис. 12).

/>

Рис № 12. Трихомонада влагалищная

I– мазок на культуры,II— мазок из влагалища, III— мазок из влагалища ( окраскаметиленовым синим) а- трихомонада: 1 ядро, 2 базальные тельца, 3 передниежгутики, 4 ундулирующая мембрана, 5 аксостиль, 6 парабазальная нить, 7лейкоциты. в – эпителиальные клетки.

На переднем конце тело имеет 4жгутика и ундулирующую мембрану, доходящую только до середины тела. Ближе кпереднему концу располагается ядро. Сквозь все тело проходит осевая нить(аксостиль), выступающая на заднем конце в виде шипика. Цитоплазма содержитвакуоли. Цист не образует, во внешней среде быстро погибает. Играет заметнуюроль в патологии мочеполовой системы, особенно у женщин. Наблюдается идлительное бессимптомное носительство, чаще у мужчин. Основными симптомамизаболевания, которое называется мочеполовым трихомонозом, являются зуд, боль,жжение, серозно-гнойные выделения (бели).

Трихомонады этого видапередаются лишь половым путем. Иногда высказываемое мнение о том, чтотрихомонады могут переселиться во влагалище из кишечника, неверно, так каккишечная и влагалищная трихомонады — это раз­ные виды с различными требованиямик условиям среды обитания. Диагноз ставят при обнаружении трихомонад ввыделениях мочеполовых путей методом микроскопии нативных или окрашенных поРомановскому мазков

Диагностика.

Исследование выделениймочеполовых путей.

При воспалительных заболеванияхмочеполовых путей обязательно исследование на наличие влагалищных трихомонад.

Патологические выделения уженщин берут для исследования с помощью влагалищных зеркал и тампона сослизистой оболочки влагалища или из его заднего свода, а при обилии выделений —с наружных половых органов или с пальца резиновой перчатки после осмотрабольной врачом.

Из уретры получают материал спомощью специальной ложечки, которую вводят до сфинктера.

У мужчин до мочеиспускания изуретры выдавливают каплю выделений. Для исследования мочевого пузыря мочуполучают катетером и микроскопируют осадок после ее центрифугирования.

Во всех случаях 1—-2 капливыделений необходимо сразу же поместить в каплю изотонического раствора хлориданатрия на предметном стекле, накрыть покровным стеклом и исследовать присреднем увеличении (Х40, х10) с сухой системой.

В препарате, приготовленномуказанным способом, вследствие быстрого высыхания подвижность трихомонад вскорепрекращается. Поэтому рекомендуют готовить препарат по типу “висячей капли”. Вполучающейся при этом влажной камере, где благодаря вазелиновой прокладкесоздается герметичность и замедляется высыхание препарата, подвижностьтрихомонад может наблюдаться иногда в течение часа. Это дает возможностьготовить препараты в процедурном кабинете и направлять их в лабораторию (вхолодное время года препараты надо доставлять в утепленном биксе).

В нативном препарате трихомонадылегко отличаются от лейкоцитов и других клеток по движению, а также по наличиюжгутов и ундулирующей мембраны. Более четко трихомонады видны при исследованиив темном поле или при фазово-контрастной микроскопии. В несвежем или подсохшеммазке трихомонады быстро прекращают свое движение, и в таком случае ихопределение становится практически невозможным.

Для диагностики трихомонадногопоражения из исследуемого материала в процедурном кабинете готовят мазки инаправляют в лабораторию, где их после подсушивания фиксируют и красят поРомановскому.

В окрашенных препаратахдостаточно четко выявляются особенности морфологии трихомонад, что наряду снеограниченным временем исследования (в противоположность нативному мазку, гдесроки доставки и микроскопии огра­ничены временем сохранения подвижноститрихомонад) делает этот метод достаточно удобным для практических условий.

Окраска по Романовскому даетлучшие результаты в модификации Н. А. Цагикян (1954). Для этого фиксированныйтонкий мазок красят 40 мин краской следующего состава: воды дистиллированной100 мл, 1% раствора карбоната натрия 15 капель и краски Романовского 4мл. По указанной модификации более четко красятся жгутики, трихомонадыстановятся хорошо различимыми. Ядра окрашиваются в фиолетово-рубиновый илифиолетовый цвет, цитоплазма—в голубой, жгутики и некоторые другие структурныеобразования — в розово--красный.

Повышению эффекта лабораторногоисследования способствует просмотр нативных и окрашенных препаратов.


Список используемой литературы.

1.  Генис Д.Е.Медицинская паразитология, М. «Медицина», 1985 г

2.  Воробьев А.А.Микробиология и иммунология, М. «Медицина», 1999 г.

3.  Коротеев А.И.Медицинская микробиология, иммунология и вирусология, С-П., 1998 г.

4.  Золотницкий В.С.Руководство к практическим занятиям по эпидемиологии и паразитологии, М.«Медицина», 1975 г.

5.  Слюсарев А.А.Биология с общей генетикой, М. «Медицина», 1978 г.

6.  Чернес Ф.К.Микробиология, М. «Медицина», 1987 г.

7.  Ярыгин В.Н.Биология, М. «Медицина», 1980 г.

еще рефераты
Еще работы по биологии