Реферат: Биотехнология, биопрепараты (вакцины, сывортки, прививки и т.д.)

<span Courier New"">

<span Courier New"">                  2БИОТЕХНОЛОГИЯ.БИОПРЕПАРАТЫ.

<span Courier New"">

<span Courier New"">   БИОТЕХНОЛОГИЯ — технология,  т.е. способ получения продуктов

<span Courier New"">из биологическихобъектов или с применением биологических объек-

<span Courier New"">тов. (Спор — этонаука или производство.)

<span Courier New"">   В качестве биологических объектов  чаще всего  используются

<span Courier New"">клетки(микроорганизмов,  растительного илиживотного происхож-

<span Courier New"">дения).Преимущества:

<span Courier New"">   1. клетки являются своего рода биофабриками белков,  жиров,

<span Courier New"">углеводов,витаминов, нуклеиновых кислот, аминокислот, антибио-

<span Courier New"">тиков, гормонов,антител, ферментов, спиртов;

<span Courier New"">   2. клетки чрезвычайно быстро воспроизводятся(бактерии -  за

<span Courier New"">20-60 мин.,дрожжевые — за 1,5-2 часа, животная — 24 часа),

<span Courier New"">   3. биосинтез сложных веществ,  таких как белки, антибиотики,

<span Courier New"">антигены,антитела  и др.  значительно экономичнее и технологи-

<span Courier New"">ческидоступнее,  чем химический синтез. Длябиосинтеза исполь-

<span Courier New"">зуются отходысельскохозяйственной,  рыбнойпродукции,  пищевой

<span Courier New"">промышленности.

<span Courier New"">   4. возможность  проведения биотехнологического  процесса  в

<span Courier New"">промышленныхмасштабах.

<span Courier New"">

<span Courier New"">    _Направления биотехнологии .:

<span Courier New"">   — медицинская (фармацевтическая, иммунная)

<span Courier New"">   — сельскохозяйственная (ветеринарная,растений)

<span Courier New"">   — промышленная (пищевая,  легкая промышленность, химическая,

<span Courier New"">энергетическая)

<span Courier New"">   — экологическая (очистка, деградация).

<span Courier New"">

<span Courier New"">                      _Историябиотехнологии

<span Courier New"">                   ( _историческиедостижения .)

<span Courier New"">

<span Courier New"">   — Земледелие, животноводство — 10-11 тыс.лет назад.

<span Courier New"">   — Селекция (интуитивная,  например, пшеницы, домашних живот-

<span Courier New"">ных), затемнаучная.

<span Courier New"">   — Биотехнология возникла примерно 5-6 тысячлет назад, когда

<span Courier New"">люди научилисьвыпекать хлеб,  варить пиво,  приготовлять сыр и

<span Courier New"">вино.

<span Courier New"">   — В 19 веке Пастером была открыта природаброжения  (начался

<span Courier New"">научный этапбиотехнологии).

<span Courier New"">   — Открытие многих микроорганизмов и способов их получения в

<span Courier New"">большомколичестве (сформировалась техническая микробиология);

<span Courier New"">в настоящее времяиз 100000 видов микроорганизмов используется

<span Courier New"">не более 100 5(см.  ниже) 0.  С 70-80-х годов ХХ века начали полу-

<span Courier New"">чатьштаммы-суперпродуценты.

<span Courier New"">   — Искусственное оплодотворение вживотноводстве, искусствен-

<span Courier New"">ное опыление врастеневодстве.  Трансплантация эмбрионов(в жи-

<span Courier New"">вотноводстве).  Разработка технологии искусственногооплодотво-

<span Courier New"">рения человека.

<span Courier New"">   — Биодобавки в медицине, животноводстве,растеневодстве.

<span Courier New"">   — Трансплантация органов.  Переливание крови. Позднее созда-

<span Courier New"">ние искусственныхорганов (искусственная почка ...).

<span Courier New"">   — Выделение ферментов,  использование иммобилизованных  фер-

<span Courier New"">ментов в молочномделе и пр.

<span Courier New"">   — Разработка получения МАТ (моноклональныхантител) гибридом

<span Courier New"">(Келлер иМильштейн, 1975; Нобелевские лауреаты)

<span Courier New"">   — Разработка и применение биосенсоров — технических средств

<span Courier New"">детектированиявеществ (с помощью антител,  ферментов,рецепто-

<span Courier New"">ров...). Ужесозданы биосенсоры более 100 веществ. /1990г./

<span Courier New"">

<span Courier New"">    _- Развитие геннойинженерии ..  Технология включениягена (ин-

<span Courier New"">сулина и пр.)Е.coli.

<span Courier New"">   — Использование микроорганизмов(бактерий,  дрожжей,  виру-

<span Courier New"">сов)  как реципиентов  чужеродного генетическогоматериала для

<span Courier New"">получениеБАВ.  Например,  получены  2рекомбинантные 0 штаммыЕ.с.,

<span Courier New"">продуцирующиеинтерфероны, инсулин, гормон роста; В.subtilis, -

<span Courier New"">вырабатывающиеинтерферон, инсулин; дрожжи — продуценты ИЛ, ре-

<span Courier New"">комбинантныевирусы осповакцины, синтезирующие антиген гепатита

<span Courier New"">В. Производстволекарственных форм  (интерлейкины,  интерферон,

<span Courier New"">тканевыйактиватор плазминогена, фактор VIII, эритропоэтин, ре-

<span Courier New"">лаксин,  использующийся для расслабления  шейки матки,  гормон

<span Courier New"">роста,  фактор роста  эпидермисаколониестимулирующие факторы,

<span Courier New"">МАТ).   4В клиниках сегодня (1988г.) проходитиспытания около 150

<span Courier New""> 4биотехнологическихлекарств. 0

<span Courier New"">   — Разработка способов переноса генов (впрыскивание в яйцек-

<span Courier New"">летку,электроток,  вирусами, плазмидами).Некоторые методы пе-

<span Courier New"">реноса дают врезультате не трансгенных животных,  а 2химер 0. Для

<span Courier New"">этого в эмбрионживотного вводят  группу  эмбриональных клеток

<span Courier New"">другоговида.  Получаемое потомство построено из«мозаики» кле-

<span Courier New"">ток,  часть которых несет гены одного из родителей,  а часть -

<span Courier New"">другого. 4Так,  широко  известная сегодня «ковца» (химеракозы и

<span Courier New""> 4овцы),выведенная в Кембридже (Англия), является такой химерой.

<span Courier New""> 4От козыона унаследовала рога, а от овцы — лохматую шкуру. 0

<span Courier New"">   — В клетки молочных желез овец введены геныфактора  IХ  ССК

<span Courier New"">(лечениегемофилии  В),  другим  — альбумин (используется после

<span Courier New"">хирургическихопераций).

<span Courier New"">   — В 1982г. Ричарду Палмитеру и Ральфу Бринстеру удалось пе-

<span Courier New"">ресадить  ген гормона  роста крысы мышке.  В итоге трансгенная

<span Courier New"">мышь была в 1,5раза большего размера, чем обычные.

<span Courier New"">   — Разработка автоматизированных синтезаторовгена.  Получение

<span Courier New"">рекомбинантныхДНК.  Разработка технологии репарацииДНК.  С по-

<span Courier New"">мощью ферментоврестрикции (их обнаружено более 400) разрезается

<span Courier New"">кольцевая плазмида,вставляется новый участок ДНК.

<span Courier New"">   — Генноинженерные  микробы (например,  «форсбан»,  защищающий

<span Courier New"">растения отзаморозков),  семена и пр.   4Рекомбинантные организмы

<span Courier New""> 4попадают  в окружающую среду (известно более 20случаев).  Нега-

<span Courier New""> 4тивныепоследствия не обнаружены. 0

<span Courier New"">   — Разработан способ усиления естественнойспособности бакуло-

<span Courier New"">вирусов поражатьнасекомых-вредителей, введя в них гены ДНК, ко-

<span Courier New"">дирующиеяды.  Если в вирусы встроить гены белковчеловека, то в

<span Courier New"">организме хозяина(насекомого) они будут усиленно продуцировать

<span Courier New"">данные белки.

<span Courier New"">   — Клонирование.

<span Courier New"">   — Технология гибридизации фрагментов ДНК иРНК, на основе ко-

<span Courier New"">торой разработаныразличные методы ( ПЦР = полимеразная  цепная

<span Courier New"">реакция/Мюллис,1983/, лигазная цепная реакция, Q-бета-система и

<span Courier New"">др.).

<span Courier New"">   — Созданная технология получения гомозиготных «knockout»-мы-

<span Courier New"">шей сотсутствием  в  их геноме  тех  или иных  генов  /Koller

<span Courier New"">B.H.,1992/.

<span Courier New"">

<span Courier New"">    _Использование микроорганизмов

<span Courier New"">   — из грибов для получения антибиотиков используются актино-

<span Courier New"">мицеты (родStreptomyces), Penicillium chrysogenum, Clphalospo-

<span Courier New"">rum acremonium,Streptomyces spp и др.

<span Courier New"">   — дрожжи (в хлебопечении,  пивоварении, виноделии, получении

<span Courier New"">соков, кормовогобелка, питательный сред для выращивания бакте-

<span Courier New"">рий и культурживотных клеток);  Из 500 известных видовдрожжей

<span Courier New"">используетсятолько несколько;

<span Courier New"">   — род Acetobacter для превращения этанола вуксусную кислоту

<span Courier New"">и уксуснойкислоты в газ;

<span Courier New"">   — род Bacillus — для получения ферментов(В.subtilis)

<span Courier New"">   — средства защиты растений(В.thuringiensis);

<span Courier New"">   — род клостридий — для сбраживания сахаров вацетон, бутанол;

<span Courier New"">   — молочно-кислые бактерии  (lactobacillus,Leuconostoc,Strep-

<span Courier New"">tococcus);

<span Courier New"">   — псевдомонады для получения витаминаВ 412 0;

<span Courier New"">   — коринебактерии glutamicum для полученияаминокислот и др.

<span Courier New"">

<span Courier New"">

<span Courier New"">                          2БИОПРЕПАРАТЫ

<span Courier New"">

<span Courier New"">    3Классификация

<span Courier New"">   I.  2Биопрепараты, использующиеся invivo

<span Courier New"">   1. АГ-ые (вакцины /в  т.ч. анатоксины/,  аллергены,  лизаты

<span Courier New"">микробов длякожных проб), создающие активный иммунитет. Специ-

<span Courier New"">фические АТ и Ткпоявляются в кровотоке примерно через неделю у

<span Courier New"">здоровогочеловека (у лиц с ИД — позже).

<span Courier New"">   2. АТ-содержащие (антисыворотки,  гамма-глобулины,  МАТ, им-

<span Courier New"">мунноемолоко),  создающие за счет готовых АТпассивный иммуни-

<span Courier New"">тет. Однако«примеси» данных биопрепаратов и ксеногенные (лоша-

<span Courier New"">диные и пр.) АТзапускают активный «вредоносный» иммунитет. По-

<span Courier New"">этомуиспользование желательно в течение 1 недели после  первой

<span Courier New"">инъекции (до  появления вторичных АТ и избежания ИК-ыхосложне-

<span Courier New"">ний,васкулитов).  Антисыворотки вводят толькопо жизненным по-

<span Courier New"">казаниям.

<span Courier New"">   3. Иммунокорректоры

<span Courier New"">   — животного происхождения (цитомедины,  интерлейкины, интер-

<span Courier New"">фероны, факторыроста, гормоны /глюкокортикоиды и др./)

<span Courier New"">   — растительного происхождения (аллергены,лектины)

<span Courier New"">   — микробного происхождения (БЦЖ,продигиозан, антибиотики)

<span Courier New"">   — химические иммунокорректоры

<span Courier New"">   4. Бактериофаги.

<span Courier New"">   Бактериофаги относятся к эффективнымпрепаратам антимикробно-

<span Courier New"">го действия,  обладающим строгой специфичностью и не вызывающим

<span Courier New"">развитиядисбактериозов,  как это имеет местопри  использовании

<span Courier New"">антибиотиков.

<span Courier New"">   II.  2Биопрепараты, использующиеся invitro

<span Courier New"">   — Диагностикумы (для РНГА) антигеновмикробов (самих  клеток,

<span Courier New"">лизатов, или  очищенных АГ-ов),  использующиеся в серологических

<span Courier New"">реакциях.  Иммунодиагностикумы — это часто взвесьизвестных уби-

<span Courier New"">тых  микробов. Для  инактивации используютвысокую температуру,

<span Courier New"">химическиевещества (формалин,  спирт,  ацетон, фенол), ультраз-

<span Courier New"">вук,  ультрафиолетовые  и рентгеновские лучи.  При выделениииз

<span Courier New"">клеток различныхАГ используют  методы  разрушения, экстракции,

<span Courier New"">обработкуферментами и различными детергентами, центрифугирова-

<span Courier New"">ние. /2551к/

<span Courier New"">   — Антигены, в т.ч.  анатоксины /токсины/ дляпроведения РП,

<span Courier New"">РН (для постановкиконтроля в серологии).

<span Courier New"">   — Диагностические антисыворотки.  Для удаления из антисыворо-

<span Courier New"">токгруппоспецифических антител в сыворотку последовательно  до-

<span Courier New"">бавляютмикроорганизмы,  в состав которых входятгрупповые анти-

<span Courier New"">гены (методКастеллани).  Таким образом получаютадсорбированные

<span Courier New"">сыворотки,которые содержат антитела к определенному виду микро-

<span Courier New"">бов. /2551к/

<span Courier New"">   — МАТ (мышиные) для ИФА,  иммуноблоттинга, ИФМ и пр. сероло-

<span Courier New"">гических реакций.

<span Courier New"">

<span Courier New"">                           АЛЛЕРГЕНЫ

<span Courier New"">

<span Courier New"">   Известно более 200 тысяч аллергенов.

<span Courier New"">   Аллергией страдает 20% населения земногошара.

<span Courier New"">

<span Courier New"">   I. ЭНДОАЛЛЕРГЕНЫ

<span Courier New"">   — тепловые — тепловая аллергия (наперегрев),

<span Courier New"">   — ожоговые белки («аллергия наУФ»),

<span Courier New"">   — холодовые эндоаллергены (измененная конформация белков на

<span Courier New"">холоду) — холодовая аллергия,

<span Courier New"">   — появляющиеся новые антигенные детерминантыпри физнагрузке

<span Courier New"">(«аллергияна физнагрузку»)

<span Courier New"">   — появляющиеся  новые антигенные  детерминанты  при стрессе

<span Courier New"">(«аллергияна стресс»)

<span Courier New"">

<span Courier New"">   II. ЭКЗОАЛЛЕРГЕНЫ

<span Courier New"">    31) Растительного происхождения

<span Courier New"">   Официально зарегистрировано  600 (598)  видов аллергических

<span Courier New"">растений.

<span Courier New"">    1Поллинозы на пыльцу 0.  Количество пыльцы в воздухе max ранним

<span Courier New"">вечером и minутром,  поэтому период активнойдеятельности надо

<span Courier New"">перенести наутренние часы.

<span Courier New"">   Пыльца деревьев:  ива, ольха,  тополь, лещина, береза,дуб,

<span Courier New"">                     клен, ясень, рябина, вяз,липа, ильм.

<span Courier New"">   Пыльца хвойных деревьев:  сосна, лиственница,  ель,  пихта,

<span Courier New"">                     кедр.

<span Courier New"">   Пыльца злаков:  овес, рожь, пшеница, пырей, рис, овсянница,

<span Courier New"">                     ежа, амброзия, тимофеевка,мятлик; загряз-

<span Courier New"">няющие зернопродукты животного,  токсического,химического ха-

<span Courier New"">рактера (аллергияна пшеничную или овсяную муку).

<span Courier New"">   Растения, вызывающие фитодерматозы: крапива,середка тополя,

<span Courier New"">                     волчье лыко,  одуванчик, марь, паслен, ле-

<span Courier New"">                     беда, полынь. /7538/91/

<span Courier New"">   Аллергены цитрусовых — какие-тобелковые  компоненты  кожуры

<span Courier New"">мандарин,лимонов, апельсин.

<span Courier New"">   Лук, клубника, малина, земляника, соя ...

<span Courier New"">   Чай, кофе, шоколад.

<span Courier New"">   Ваниль, горчица,  гвоздика, миндаль, корица, мускатный орех,

<span Courier New"">чеснок,сельдерей, перец.

<span Courier New"">

<span Courier New"">    32) Животного происхождения

<span Courier New"">   — кожный эпителий животных (перья и пухптиц,  «шерсть»  жи-

<span Courier New"">вотных — пуховыеи шерстяные изделия)

<span Courier New"">   — корм для аквариумных рыбок (сухие рачки идафнии)

<span Courier New"">   — экстракт тараканов

<span Courier New"">   — морские продукты, особенно богатые иодом

<span Courier New"">   — мед, яйца,  рыба и икра,  свинина, куриное мясо,

<span Courier New"">   — молоко (альфа-лактальбумин, казеин) — 7% аллергийу детей;

<span Courier New"">У кипяченого  молока аллергические свойства резко падают(меня-

<span Courier New"">ется структурабелков). Молоко заменяют кефиром, творогом и пр.

<span Courier New"">Сыр.

<span Courier New"">   — яды насекомых

<span Courier New"">   — препараты крови, лечебные сыворотки.

<span Courier New"">

<span Courier New"">    33) 1  3микробногопроисхождения

<span Courier New"">   — Некоторые АГ пневмококков, стафилококков,стрептококков,

<span Courier New"">   — АГ дрожжей /аллергия на хлеб/,

<span Courier New"">   — АГ спор плесневых грибов — ГП (М. более 40кД),

<span Courier New"">   — АГ паразитов

<span Courier New"">   — АГ вакцин

<span Courier New"">   — Антибиотики

<span Courier New"">

<span Courier New"">    34) химического происхождения

<span Courier New"">   — краски, лаки, моющие средства, косметика (только 20% кос-

<span Courier New"">метическихсредств безопасны в отношении аллергии /1652к/),

<span Courier New"">   — лекарственные препараты(сульфаниламиды,  новокаин, дикаин

<span Courier New"">и др.анальгетики, анестетики /аспирин, анальгин/), [анальгети-

<span Courier New"">ки — блокируютболевую чувствительность; анестетики — подавляют

<span Courier New"">любой видчувствительности]

<span Courier New"">   — отходы химического производства  /профессиональные  болез-

<span Courier New"">ни/,

<span Courier New"">   — рентгеноконтрастные вещества

<span Courier New"">   — дезинфецирующие средства и пр.

<span Courier New"">[5) физическогопроисхождения (см. эндоаллергены).]

<span Courier New"">

<span Courier New"">6) Промышленная,бытовая и библиотечная  3пыль 0.

<span Courier New"">   — клещ домашней пыли

<span Courier New"">

<span Courier New"">   Проба на аллергены: за рубежом накладываютманжету на предп-

<span Courier New"">лечье с  40 ячейками, в каждой их которых один из основных ал-

<span Courier New"">лергенов. Через1-2 сут оценивается зона покраснения  и  соот-

<span Courier New"">ветствующаяячейка. (У пожилых лиц пробы чаще отрицательные.)

<span Courier New"">

<span Courier New"">.

<span Courier New"">

<span Courier New"">                3АНТИТЕЛО-СОДЕРЖАЩИЕБИОПРЕПАРАТЫ

<span Courier New"">                 (вызывают пассивный иммунитет)

<span Courier New"">

<span Courier New"">   АТ-содержащие биопрепараты включают антимикробныеили  анти-

<span Courier New"">токсические АТ ииспользуются для лечения или диагностики. Ан-

<span Courier New"">тисывороткииспользуют по жизненным показаниям с целью экстрен-

<span Courier New"">нойсеропрофилактики (при непосредственной угрозе заболевания).

<span Courier New"">

<span Courier New"">   1) Кровь, плазма (переливание). Сыворотки. _Антисыворотки ..

<span Courier New"">   2)  _Гамма-глобулины .(общие,  направленного действия, получае-

<span Courier New"">мые либо послеиммунизации,  либо от лица,  недавно перенесшего

<span Courier New"">заболевание).

<span Courier New"">   3)  _МАТ . (пока только мышиные,человеческие гибридомы в насто-

<span Courier New"">ящее времяотсутствуют).

<span Courier New"">    14) Иммунное молоко. Сочетаниепарентеральной и диалетической

<span Courier New""> 1иммунизациипозволило получить  _иммунное молоко .,  содержащее ан-

<span Courier New""> 1титела квибрионам холеры и токсину,  ЭПКП,  протеям, шигеллам

<span Courier New""> 1Зонне.  В настоящее время наметились 2 тенденции  в технологии

<span Courier New""> 1изготовленияпрепаратов иммунного молока — получение  _лактосыво-

<span Courier New""> _ 1ротокили лактоглобулинов … Лактосыворотка, в отличие от лактог-

<span Courier New""> 1лобулина,  обладает большей буферной емкостью, содержитингиби-

<span Courier New""> 1торытрипсина и химотрипсина, что в известной степени обеспечи-

<span Courier New""> 1вает  устойчивость белков коровьего молока кдействию ферментов

<span Courier New""> 1ЖКТ.  Кроме того, некоторые белки лактосыворотки(лактоперокси-

<span Courier New""> 1даза,лактоферрин, лизоцим и др.) оказывают неспецифическое ан-

<span Courier New""> 1тимикробноедействие и способы  потенцировать  защитный эффект

<span Courier New""> 1специфическихантител. /2114к/87/ — (ПОВТОР материала по ОКИ)

<span Courier New"">    _Получение антисыворотки из молока

<span Courier New"">    4Молозиво центрифугируют  при 20000 об./мин.  2 часа при 4 50 4С,

<span Courier New""> 4липидныйслой отделяют (обезжиривание).  Казеиносаждают титро-

<span Courier New""> 4ванием 1Нуксусной кислотой до рН 4,6 с последующим центрифуги-

<span Courier New""> 4рованием втех же условиях.  Используют надосадок,который диа-

<span Courier New""> 4лизируют в0,01М растворе фосфатного буфера с рН 7,0. Для выде-

<span Courier New""> 4ленияочищенной фракции Ig A  можно  использовать ионообменную

<span Courier New""> 4хроматографию(ИОХ) на ДЭАЭ-целлюлозе. /6737/ 0

<span Courier New"">   5) Антиидиотипические АТ используют  для запуска  активного

<span Courier New"">иммунитета,поэтому называют антиидиотипическими вакцинами  4(см.

<span Courier New""> 4материалпо вакцинам) 0

<span Courier New"">

<span Courier New"">    _ 2Получение  0АТ .-содержащих препаратов

<span Courier New"">   I. От иммунизированных животных

<span Courier New"">  II. Из крови иммунных лиц (недавновыздоровевших)

<span Courier New"">

<span Courier New"">                      _Иммунизацияживотных

<span Courier New"">        ┌────────────────────┴─────────────────────┐

<span Courier New"">    селезенка мыши                                Кровь

<span Courier New"">         │                                         │

<span Courier New"">    выделение                               Ретракциясгустка

<span Courier New"">    ПК, синтезирующих                       (40 минут,  37 5о 0С)

<span Courier New"">    искомые АТ                                      │

<span Courier New"">         │                                      Сыворотка

<span Courier New"">    ПК+ (В-лимфоцит,                         (=антисыворотка)

<span Courier New"">    инфицированный ВЭБ                              │

<span Courier New"">    — лимфомная клетка)                    (Высаливание,

<span Courier New"">    + ПЭГ                                 спиртовоеосаждение,

<span Courier New"">         │                                     адсорбция)

<span Courier New"">    Гибридома — активация                         │

<span Courier New"">         │        клеток                     Гамма-фракция

<span Courier New"">        МАТ          │                       иммуноглобулинов

<span Courier New"">                 ИФ, ФНО, ИЛ                        │

<span Courier New"">                 в питательной               Аффинная хромато-

<span Courier New"">                 среде                       графия (сорбция

<span Courier New"">                     │                       на комплекс «АГ-

<span Courier New»">                     │                       носитель"

<span Courier New"">                 Реакция на                         │

<span Courier New"">                 «примеси»                   Моновалентные АТ

<span Courier New"">

<span Courier New"">

<span Courier New"">    31. Иммунизация

<span Courier New"">   Первая иммунизация вызывает первичный ИО;вторая и последую-

<span Courier New"">щие — вторичныйИО.  Многократную иммунизациюназывают  гипе-

<span Courier New"">риммунизацией(--- гипериммунная сыворотка).

<span Courier New"">   Способы иммунизации животных:

<span Courier New"">    2- в/кож. 0 (объем до 100 мкл)--- региональные ЛУ

<span Courier New"">    2- п/кож. 0  (объем 1-30 мкл).  При данном способе  иммунизации

<span Courier New"">антигенраспространяется медленно,  т.к.подкожная клетчатка не

<span Courier New"">имеет развитыхлимфатических протоков.

<span Courier New"">    2- в/мыш. 0  (0,5-8мл соответственно для мышей-кроликов) в об-

<span Courier New"">ласть бедра;птицам в грудную мышцу.

<span Courier New"">    2- в/бр. 0 (2-30мл соответственнодля мышей-кроликов); при этом

<span Courier New"">животноеопускается головой вниз;

<span Courier New"">    2- в/в 0 (1-10мл);  если в боковую вену хвоста, то хвост предва-

<span Courier New"">рительноопускается в стакан с горячей водой -55 5о 0С;

<span Courier New"">    2- интраназально 0  (по каплям  от 0,03 до 1 млсоответственно

<span Courier New"">длямышей-кроликов);

<span Courier New"">    2- оральное введение 0 (0,3-5мл): антиген смешивают с кормом и

<span Courier New"">скармливают или ввиде питья,  можно через зонд — в  желудок.

<span Courier New"">/7143/89/1

<span Courier New"">   —  2per rectum 0

<span Courier New"">    5Пример:

<span Courier New"">    5Один объем антигена смешивают с 3объемами полного адъюванта

<span Courier New""> 5Фрейнда итщательно  перемешивают.  Полученную эмульсию  вводят

<span Courier New""> 5внутрикожнопо 0,1мл в 10 точек спины, расположенных по 5 в ряд

<span Courier New""> 5нарасстоянии 2 см по обе стороны от позвоночника. Общая  доза

<span Courier New""> 5иммуногенаравна 10-100 мкг на кролика. Иммунизируют 6 кроликов

<span Courier New""> 5массой по2 кг.  Через 8-10 недель проводят пробноекровопуска-

<span Courier New""> 5ние.  При удовлетворительном качестве антисыворотки последова-

<span Courier New""> 5тельнопроводят до 3 кровопусканий,  послечего  кроликам  дают

<span Courier New""> 5отдохнутьв течение 1 месяца и затем делают следующие кровопус-

<span Courier New""> 5кания. Принеудовлетворительном качестве антисыворотки проводят

<span Courier New""> 5вторичную  иммунизацию, используя половинную дозу иммуногена в

<span Courier New""> 5неполномадъюванте Фрейнда. Иммунизируют подкожно в складку ко-

<span Courier New""> 5жи нашее.  Через 10 суток делают пробноекровопускание и опре-

<span Courier New""> 5деляюткачество антисыворотки. При неудовлетворительном качест-

<span Courier New""> 5ве  индивидуальной антисыворотки иммунизируютновую группу кро-

<span Courier New""> 5ликов илиживотных другого вида. /6817/84/ 0

<span Courier New"">    32. Получение крови и сыворотки

<span Courier New"">   У животных или иммунизированного человекаберут кровь в пус-

<span Courier New"">тые  пробирки, после ее свертывания откручивают на центрифуге,

<span Courier New"">получаетсят.н.  антисыворотка,  из которой можно выделить гам-

<span Courier New"">ма-глобулиновуюфракцию.

<span Courier New"">   Противоэнцефалитный иммуноглобулин получалииз сывороток лю-

<span Courier New"">дей, проживающихв местах распространения данного заболевания,

<span Courier New"">содержащихдостаточно  высокий уровень специфическихпротивови-

<span Courier New"">русных антител./1430к/

<span Courier New"">    32.  2О 3чистка 0( 3фракционирование 0) и тестирование

<span Courier New"">   — Осаждение

<span Courier New"">     — высаливанием  (осаждение сульфатом натрия или сульфатом

<span Courier New"">        аммония)

<span Courier New"">     — осаждение спиртом

<span Courier New"">     — полиэтиленгликолем (ПЭГ)

<span Courier New"">     — каприловой кислотой

<span Courier New"">   — ферментирование

<span Courier New"">   — диализ

<span Courier New"">   — адсорбция

<span Courier New"">     — аффинной хроматографией

<span Courier New"">     — выделение на белок А-сефарозе (FcRзолотистого стафило-

<span Courier New"">        кокка)

<span Courier New"">

<span Courier New"">   Силу антитоксических сывороток измеряют вмеждународных еди-

<span Courier New"">ницах (МЕ) поспособности нейтрализовать определенную дозу ток-

<span Courier New"">сина.

<span Courier New"">

<span Courier New"">                          _Антисыворотки

<span Courier New"">

<span Courier New"">   — Лечебные         │  (используется только по

<span Courier New"">   — Профилактические │  жизненным показаниям)

<span Courier New"">   — Диагностические

<span Courier New"">

<span Courier New"">   По специфичности различают

<span Courier New"">- моновалентнуюантисыворотку

<span Courier New"">- поливалентнуюантисыворотку

<span Courier New"">- антицельнуюантисыворотку (против всех сывороточных белков -

<span Courier New"">  36)

<span Courier New"">

<span Courier New"">    _Недостатки антисывороток .:

<span Courier New"">   — Выделенная из крови сыворотка,  сколько бы ее не очищали и

<span Courier New"">ни концентрировали,  содержит набор различных антител.  Поэтому

<span Courier New"">ее называютполиклональной.  Лишь  _небольшаячасть антител .  нап-

<span Courier New"">равлена _против специфичных антигенных детерминант ..

<span Courier New"">   — Иммуноглобулины антисывороток уже соткрытыми  углеводными

<span Courier New"">компонентами,поэтому  _быстрее выводятся из организма ..

<span Courier New"">   — Углеводные компоненты,  переплетаясь между собой, приводят

<span Courier New"">к спонтанной _агрегации белков . при длительном хранении, что спо-

<span Courier New"">собствует вкровотоке закупорке некоторого количества капилля-

<span Courier New"">ров и активациисистемы комплемента по альтернативному пути.

<span Courier New"">   — " _Примесные АТ ."дают многочисленные «перекрестные» положи-

<span Courier New"">тельныереакции,  которые приводят к ошибочнымдиагнозам по се-

<span Courier New"">родиагностике.

<span Courier New"">   — " _Примесные АГ .".Иные белки сыворотки могут содержать раст-

<span Courier New"">воримые(сброшенные) антигены HLA,  АВ, Rh, иныеаллотипы анти-

<span Courier New"">тел и др., чтоиммунизирует реципиента.

<span Courier New"">   — Ксеногенные (лошадиные) сыворотки приповторном введении в

<span Courier New"">организм могутвызывать  _аллергические реакции . на чужеродный бе-

<span Courier New"">лок.  Поэтому необходима постановка _внутрикожной пробы . с  сыво-

<span Courier New"">роткой вразведении 1:100 в объеме 0,1 мл. Введение антитокси-

<span Courier New"">ческой лошадинойсыворотки допустимо лишь в  случае  отсутствия

<span Courier New"">выраженной кожнойреакции в течение 20-30 минут. /1430к/

<span Courier New"">   — Ещеодин серьезный недостаток:  для полученияантител каж-

<span Courier New"">дый разнеобходимо  _заново иммунизировать . животных и очищать вы-

<span Courier New"">деленнуюсыворотку. Это стоит немалых денег.

<span Courier New"">

<span Courier New"">

<span Courier New"">             _Гамма-глобулины(преимущественно Ig G)

<span Courier New"">

<span Courier New"">   Содержание антител в препаратахиммуноглобулинов человека:

<span Courier New"">   — АТ к токсинам (дифтерийному, столбнячному,пертуссигену)

<span Courier New"">   — Титры агглютинирующих АТ к штаммамвозбудителей располага-

<span Courier New"">ются в следующемпорядке (по убыванию)

<span Courier New"">   — P. aeruqinosa

<span Courier New"">   — S. sanguis,

<span Courier New"">    — B.melaninogenicus,

<span Courier New"">   — B. bronchisrptica,

<span Courier New"">   — Veillonella,

<span Courier New"">   — E. coli.

<span Courier New"">   Титры к E.c. очень низкие. /2384к/84/

<span Courier New"">

<span Courier New"">                Использование  иммуноглобулинов

<span Courier New"">              для пассивной иммунизации/7330/87/

<span Courier New"">────────────────────┬─────────────────────┬────────────────────

<span Courier New"">   Пулированные     │   Специфические    │    Специфические

<span Courier New"">   Ig человека      │     Ig человека     │   лошадиные  Ig

<span Courier New"">────────────────────┴─────────────────────┴────────────────────

<span Courier New"">ГуморальныйИД       Гепатит В              Ботулинум токсин

<span Courier New"">Гепатит А            Бешенство              Дифтерийный токсин

<span Courier New"">Корь                 Столбняк               Змеиный яд

<span Courier New"">                     Ветряная оспа          Яд паука

<span Courier New"">                     Натуральная оспа       Black widow

<span Courier New"">                     (коровья оспа)

<span Courier New"">                     Rh изоиммунизация

<span Courier New"">                     pertussis

<span Courier New"">───────────────────────────────────────────────────────────────

<span Courier New"">

<span Courier New"">

<span Courier New"">                               2МАТ

<span Courier New"">

<span Courier New"">    2МАТ (моноклональные  ант

еще рефераты
Еще работы по медицине