Реферат: Изучение радиологических эффектов у высших растений, обитающих на территории Восточно-Уральского радиоактивного следа
/>/>/>/>/>Оглавление
Введение
1 Обзор литературных данных
2 Материал и методикаисследования
3 Результаты и обсуждение
3.1 Цитогенетические исследования
3.1.1 Спонтанный мутагенез
3.1.2 Влияние неравномерногофракционированного облучения на прозанник пятнистый(Achyrophorus maculatus L.)
3.1.2.1 Влияние на индуцированный мутагенез γ-лучей60Со в дозе 5 Гр
3.1.2.2 Влияние на индуцированный мутагенез γ-лучей60Со в дозе 30 Гр
3.1.2.3 Значение временной организации фракционированногооблучения в формировании радиологического эффекта
3.2 Биохимические исследования
Заключение
Список использованной литературы
Приложения
Введение
29 сентября 1957 года вследствие теплового взрыва емкости срадиоактивными отходами на Южном Урале (химкомбинат «Маяк») произошла одна изнаиболее крупных ядерных аварий. Суммарный выброс радионуклидов был равен 7,4×1016Бк[I].Исключительно важное радиологическое значение имело присутствие в составе смесидолгоживущего радионуклида – 90Sr с периодом полураспада 28,5 лет, что и предопределилодлительную опасность этого радиоактивного загрязнения [5]. В результатеуказанного выброса образовался ВУРС[II] – уникальныйполигон для изучения эффектов хронического облучения малыми дозами [7].
Изучение механизмов радиорезистентности природных популяцийрегиона Кыштымской аварии вносит вклад в разработку проблемы накопленияпатологического груза, механизмов адаптации к радиационной среде,прогнозирования отдаленных последствий и поиску средств их коррекции [16]. Актуальностьэтой проблемы определяется тем, что на ясном понимании закономерностейформирования биологических эффектов малых доз ионизирующего излучения должна основыватьсяразработка новой концепции радиационной защиты человека и биоты [8].
В плане выяснения природы явлений, наблюдающихся прифракционировании дозы, значительный интерес представляют работы с описанием защитыот радиации под действием предварительного облучения малой дозой. Радиацияобладает многосторонним действием на клетку и организм и наложение двух дозотражается неодинаково на отдельных составляющих радиационного эффекта, влияяна выход цитогенетических нарушений [12].
Целями настоящей работы на высших растениях с территории ВУРСаявляются:
> изучениевлияния малых доз ионизирующих излучений на спонтанный мутагенез;
> межвидовыесравнения хромосомной нестабильности;
> исследованиеэффекта неравномерного фракционированного облучения;
> определениероли антиоксидантных систем в формировании радиопротекторного эффекта.
Для достижения целей необходимо выполнение следующих задач:
а) ознакомлениес объектами исследования и условиями их обитания;
б) анализсостояния проблем на сегодняшний день;
в) освоениеметодик исследований и применение их на практике;
г) применениеметодов вариационной статистики для обработки и анализа эмпирических данных.
/>/>/>1 Обзор литературных данных
Изучение мутационного процесса в природных популяциях,подвергающихся хроническому действию ионизирующих излучений, важно в связи c задачами, возникающими втеории эволюции, с разработкой проблем охраны окружающей среды, дляпрогнозирования отдаленных генетических последствий загрязнения биосферырадионуклидами [4].
Среди классических методов радиобиологии и радиационной генетикинаибольший интерес представляет прием повторного действия мутагенов. При взаимодействииэффектов двух доз возможно модифицирующее влияние предыдущего облучения нарезультат последующего. Фракционирование дозы облучения является методоманализа процессов восстановления [12, 25], кроме того, оно неодинаковоотражается на отдельных составляющих радиационного эффекта. При повторномоблучении в определенных условиях возникает эффект защиты, который наиболеелегко обнаружить при использовании первого облучения в небольшой дозе [12].Считается, что хроническое облучение является частным случаем фракционированиядозы [25].
Решающим фактором в ответной реакции клетки является доза. Клеткаобладает способностью устранить нанесенное ей повреждение. Помимо суммарнойдозы на ход реакции восстановления влияет и мощность доз. Как правило, приуменьшении мощности доз, т.е. при растягивании времени облучения, процессвосстановления выражен сильнее, а лучевое поражение меньше [11].
Многие авторы указывают на повреждающее действие повышенного фонарадиоактивности, однако положительное действие малых доз радиации также широкоизвестно: стимуляция биологических процессов: роста, развития, выживаемости,плодовитости, исцеления и др. [12, 21]. В популяциях дикорастущих растений,произрастающих на загрязненных радионуклидами территориях, произошлиадаптационные изменения, выражающиеся в повышенной радиоустойчивости посравнению с популяциями тех же видов, произрастающими на чистых незагрязненныхпочвах [3, 4, 17, 24]. Одним из механизмов повышения радиоустойчивости облучаемыхорганизмов является увеличенное содержание в их тканях антиоксидантов [17]. Однакомутационный процесс в облучаемых популяциях растений протекает более интенсивнопо сравнению с контрольными [4, 24].
Сравнение биохимических показателей у двух видов мелкихмлекопитающих, обитающих на контрольных и радиационно-загрязненных территорияхВУРСа позволило отнести характеристики окислительно-восстановительногометаболизма к основным физиологическим детерминантами (определителями) ихрадиорезистентности к длительному низкоинтенсивному воздействию [16].
Приступая к экспериментам с предварительным облучением малойдозой, авторы [13] предполагали, что данное воздействие может вызвать скрытыелучевые повреждения, снижающие выживаемость объекта после дополнительного облучениямассивной дозой, однако их предположения не подтвердились. Снижение частотыхромосомных аберраций при фракционировании дозы связано с обратимымифизиологическими изменениями в клетке, которые делают хромосомы менеечувствительными ко второй экспозиции [1]. Авторами [13] высказывается предположение,что радиобиологические эффекты радиостимуляции и повышения радиорезистентностипод влиянием предварительного облучения малыми дозами регулируются единым механизмом.
В основе радиационно-химических изменений молекул могут лежать двамеханизма. 1. Прямое действие, при котором данная молекула испытывает изменениенепосредственно при прохождении через нее кванта энергии. 2. Косвенное действие– изменяемая молекула непосредственно не поглощает энергию падающего излучения,а получает ее путем передачи от другой молекулы [9, 25].
Ионизирующие излучения характеризуются незадержанным эффектоминдуцирования аберраций хромосом [12], что позволяет использовать в качествеколичественного показателя радиочувствительности подсчет клеток с хромосомнымиперестройками. Оценка поражения может проводиться путем мета- или анафазногоанализа, но первый из них весьма трудоемок. При анализе анафаз легко различимы«летальные» для клетки аберрации – дицентрики и фрагменты; достоинством этогометода является относительная простота, делающая его доступным и в то же времядостаточно корректным для оценки радиочувствительности [25]. Часть аберраций,как, например, дицентрики, механически препятствует делению клетки; появлениеацентрических фрагментов приводит к неравномерному разделению и утратегенетического материала, вызывающего гибель клетки из-за нехватки метаболитов,синтез которых кодировался ДНК утраченной части хромосомы [11, 25]. Учетчастоты фрагментов, однако, не является достаточно надежным показателемвследствие того, что фрагменты могут вовлекаться расходящимися хромосомами ванафазные шапки, где они не обнаруживаются, после чего элиминируются,объединяясь в микроядра; к тому же, фрагменты могут теряться в процессеприготовления препаратов [12, 25].
Структурно-метаболическая теория (СМТ) в радиобиологии являетсясовременным обобщением огромного фактического материала и ранее существовавшихтеорий в радиобиологии в свете представлений о неразрывном единстве ивзаимовлиянии структуры и метаболизма. СМТ исходит из положения, что придействии радиации на клетку первичные процессы возникают во всех ее структурахи затрагивают многие метаболические процессы, неразрывно связанные с этимиструктурами. Любой радиобиологический эффект возникает во времени в результатевзаимодействия многих процессов, как развившихся после облучения, так инормально протекающих в клетке. СМТ подчеркивает значение фактора времени впроявлении любых радиобиологических эффектов. Скорость протекания процессов,происходящих в клетке после облучения, будет зависеть не только от места ивеличины поглощенной энергии, наличия веществ, обрывающих цепные процессы. Структурно-метаболическаятеория рассматривает механизмы поражающего действия сублетальных и летальныхдоз радиации, так и стимулирующего действия малых доз радиации. СМТ являетсяобщей теорией действия радиации на биологические объекты, начиная с клеточногоуровня и заканчивая высокоорганизованными многоклеточными организмами [9].
/>/>/>2 Материал и методика исследования
Объектами исследования являются многолетние травянистые растения[III]:Прозанник пятнистый – Achyrophorus maculatus L. (семействоСложноцветные; 2n = 10, рис. 1А; стр. I) и два вида подорожника: Подорожникланцетолистный – Plantago lanceolata L. (2n = 12, рис. 1Б) иПодорожник средний – Plantago media L. (2n = 24, рис. 1В, оба из семействаПодорожниковые) [13]. Семена всех видов растений были собраны на территорииВосточно-Уральского радиоактивного следа как с контрольных участков, так и сзагрязнённых радионуклидами 90Sr–90Y и 137Cs. В местах сбора материала первоначальноезагрязнение составляло 1500-2000 Ки[IV]/км2; 90% дозыформируется за счёт распада 90Sr и 10% – за счёт 137Cs. В настоящее времяпрошло 1,7 периодов полураспада радиостронция и остаточное загрязнениесоставляет 525 Ки/км2 (интенсивность γ-излучения 0,8 рад/сутки) (рис. 2;стр. II) [15].
Реагенты: раствор гидроперита (0,0025 М), раствор крахмала (0,125%по массе), раствор йода (0,0125% по массе).
Оценка уровня спонтанного мутагенеза проводилась на всех указанныхвидах, эффекты фракционированного облучения – на A. maculatus, биохимическиеисследования – на двух видах подорожника.
Семена A. maculatus провокационно облучались γ-лучами 60Co при мощности дозы 219рад/мин[V]. Применялосьнеравномерное фракционированное облучение (начальная доза 5 Гр[VI];разрешающая доза 30 Гр) с интервалами между фракциями 1 час или 1 сутки.Изучались варианты: без облучения, с облучением в малой дозе (5 Гр), соблучением в массивной дозе (30 Гр), а также варианты с различной временнойорганизацией облучения (сочетание 5 Гр + 30 Гр).
Исследуемые семена проращивались, и фиксировались проростки подостижении длины корешка в 4-5 мм для прозанника и 2-3 мм для подорожников всмеси этанола и «ледяной» уксусной кислоты в компонентном отношении 3:1.Учитывались частоты хромосомных аберраций в ана-телофазе митоза в клеткахкорешков, для чего растения окрашивали ацетокармином в течение 5-15 минут наводяной бане. Давленые временные микропрепараты изготовлялись из кончикакорешка длиной около 2 мм. Наблюдения производили при 600-кратном увеличении сводной иммерсией, используя зеленый фильтр. В каждом варианте просчитывалось всреднем по 500 ана-телофаз.
Микропрепараты фотографировались по авторской методике безприменения аналогового цифрового преобразователя при 900-кратном увеличении смасляной иммерсией с помощью цифрового фотоаппарата мобильного телефона LG B2100 (рис. 3; стр. III, IV).
Биохимические исследования проводились на P. lanceolata и P. media методом йодометрии(титрование), в основе которого лежит реакция [6, 22]: 5H2O2 + I2 = 4H2O + 2HIO3.
Отобранные для анализа растения, тщательно очищенные от земли иобсушенные фильтровальной бумагой до постоянного веса, взвешивались ирастирались со стеклянным порошком в фарфоровой ступке. Полученная смесьразводилась дистиллированной водой в расчете 9 мл воды на каждые 100 мграстения и центрифугировалась на ручной центрифуге в течение 5 минут при скоростивращения 1200 об/мин.
В раствор гидроперита, объёмом 5 мл, добавлялись 0,2 млнадосадочной жидкости, и смесь выдерживалась в течение 30 секунд, после чегоприливались 3 мл раствора крахмала в качестве индикатора. Смесь титроваласьйодом до получения эталонной голубой окраски, сохраняющейся в течение 3 секунд,после чего регистрировался объём затраченного йода.
Для статистической обработки данных использовались следующиеметоды: дисперсионный анализ двухфакторных неравномерных комплексов длякачественных признаков; дисперсионный анализ однофакторных комплексов длякачественных признаков; критерий χ²; точный критерий Фишера (F); критерий Стьюдента (td); критерий «ФИ» (Fφ). Для данной обработки втаблицах Excel автором работы были созданы алгоритмы вычисления необходимыхпоказателей с использованием литературы [14, 23].
/>/>/>3 Результаты иобсуждение/> 3.1 Цитогенетические исследования
Результаты данных исследований позволяют выявить зависимость изменениярадиочувствительности высших растений как минимум от трех факторов: хроническогоβ-, γ-облучения; числа хромосом в кариотипе (плоидности); предварительногоγ-облучения при неравномерном фракционировании дозы. Результатыматематической обработки данных представлены в таблицах 1, 2 и на рисунках 5-10.
/>/>/>/> 3.1.1 Спонтанный мутагенезХроническое облучение вызывает достоверное увеличение частотыаберрантных анафаз в опытных популяциях A. maculatus (p << 0,001) и P. media (p < 0,01), в то жевремя, в популяциях P. lanceolata отмеченного феномена не наблюдается (p > 0,05), что непротиворечит литературным данным [22]. Возрастание частоты аберрантных анафазсвязано с ускоренным накоплением мутационного груза [2, 3, 4], так как фон отрадионуклидов более чем в 100 раз превышает естественный радиационный фон.
В хронически облучаемых популяциях прозанника по сравнению сконтрольными происходит достоверное увеличение частоты дицентриков(χ² = 26,96, ν = ∞, р < 0,001; рис. 6; стр. VI). В экспериментеоблучали покоящиеся семена, поэтому двойные разрывы хромосом, приводящие кобразованию дицентриков, оставались нереализованными до начала прорастания,когда, вследствие увеличения теплового движения, обломки хромосом смещаются,образуя разнообразные транслокации (рис. 3-4; стр. III–IV), то есть изпотенциальных повреждения переходят в летальные [12]. Однако в популяциях обоихвидов подорожника изменения частоты дицентриков не происходит (р >> 0,05;рис. 6; стр. VI).
Не обнаружены отличия в частоте ацентрических фрагментов в опытныхи контрольных популяциях A. maculatus (F = 0,98, ν = 27, р >> 0,05; рис. 7; стр. VI), в тоже время, вопытных популяциях P. lanceolata наблюдается достоверное увеличение частоты этого видааберраций по сравнению с контрольными (p < 0,01; рис. 7; стр. V). Однако в хроническиоблучаемых популяциях P. media отмечено достоверное (р < 0,001) снижение частотыацентрических фрагментов по сравнению с незагрязненными радионуклидами популяциями.
Как известно, растения с большей плоидностью обладают повышеннойнеспецифической устойчивостью к действию экстремальных абиотических факторовсреды обитания, например, в более высоких широтах преобладают полиплоидныеформы, имеющие селективные преимущества по сравнению с диплоидными [18].Дисперсионный анализ показал достоверное (F = 15,0; ν = 1500; р< 0,001) влияние фактора плоидности на радиоадаптивный ответ исследованныхрастений: у P.media отмечена меньшая частотааберрантных анафаз как в контрольных (р < 0,001), так и в опытных (р <0,01) популяциях по сравнению с популяциями P. lanceolata, произрастающими в такихже экологических условиях.
/>/>/>/> 3.1.2 Влияние неравномерного фракционированного облучения на прозанник пятнистый(Achyrophorus maculatus L.)Из результатов двухфакторного дисперсионного анализа следует, чтокак хроническое облучение (p < 0,01), так и различным образом организованноедополнительное радиационное воздействие (p << 0,001), а такжесочетания этих факторов достоверно (p << 0,001) изменяют радиобиологическийответ исследованных растений.
/>/>/>/> 3.1.2.1 Влияние на индуцированный мутагенезγ-лучей 60Со в дозе 5 Гр/>Облучение в дозе 5 Гр вконтрольных популяциях не вызывает достоверного изменения частоты как аберрантныханафаз (td = 1,56, ν = ∞, р >> 0,05; рис. 8; стр. VIII), так и частоты дицентриков(Fφ = 1,56, ν = ∞,р >> 0,05; рис. 9; стр. IX) и ацентрических фрагментов (F = 0,94, ν = 18, р>> 0,05; рис. 10; стр. IX). Данные факты позволяют дозу γ-лучей в 5Гр считать малой для данного вида.
В опытных популяциях частоты аберрантных анафаз (td = 6,77, ν = ∞,р < 0,001; рис. 8; стр. VIII) и ацентрических фрагментов (F = 27,08, ν = 19, р< 0,001; рис. 10; стр. IX) достоверно возрастают, но частота дицентриков неизменяется (Fφ = 0,69, ν = ∞, р >> 0,05; рис. 9; стр. IX).
/>/>3.1.2.2. Влияние на индуцированный мутагенез γ-лучей60Со в дозе 30 ГрВлияние провокационной дозы в 30 Гр на опытную и контрольнуюпопуляции проявляется в достоверном увеличении как частоты аберрантных анафаз(р < 0,001), так и общей частоты аберраций (дицентрики + фрагменты). Междуконтрольной и опытной популяциями по указанным показателям различий не наблюдается(p >> 0,05), чтосвидетельствует о достаточности этой дозы для возникновения устойчивогоцитогенетического эффекта. В то же время, обращает на себя внимание отсутствиеразличий в эффектах доз в 30 и 5 Гр в опытной популяции, что может свидетельствовать,на наш взгляд, о действии дополнительных не учитываемых факторов привоздействии малой дозой (рис. 8).
/>/>/>/> 3.1.2.3 Значение временной организациифракционированного облучения в формировании радиологического эффекта/>Реакции, возникающие воблученной клетке, подчиняются кинетическим закономерностям, скоростьдостижения конечного состояния будет определяться не только скоростью прямых,но и скоростью обратных реакций (процессов восстановления). Кинетика процессабудет зависеть от ингибиторов и катализаторов реакции, наличия веществ,обрывающих цепные процессы и других условий [9].
Из данных [20] следует, что существует два механизма адаптивногоответа у растений. Первый – это повышение способности репарировать поврежденияДНК после воздействия малой дозой. Второй – стимулированная репопуляция –феномен, заключающийся в замещении поврежденных клеток неповрежденными.
При часовом интервале между фракциями в контрольных популяцияхнаблюдается радиологический эффект, подчиняющийся принципу аддитивности:эффекты двух фракций суммируются, так как получено достоверное (p < 0,001) увеличениечастоты аберрантных анафаз по сравнению с эффектом дозы в 30 Гр. В опытнойпопуляции не обнаружено отличий между аналогичными вариантами (p > 0,05; рис. 8).Представленные данные свидетельствуют, что у растений из опытной популяциипроцессы восстановления протекают интенсивнее, что может быть объясненоприспособлением к действию повышенного фона радиации.
В обеих исследованных популяциях наблюдается достоверное снижениечастоты аберрантных анафаз при увеличении интервала между фракциями (p < 0,001). Следуетобратить внимание, что в опытной популяции частота аберрантных анафаз вварианте с суточным интервалом между фракциями достоверно (Fφ = 4,21, ν = ∞,р < 0,05) меньше, чем в контроле. Данные явления могут быть объясненыпроцессом стимулированной репопуляции, более интенсивно протекающим в растенияхиз загрязненной популяции.
3.2 Биохимические исследования
Результаты биохимических исследований представлены в таблице 3 ина рисунках 11, 12 (стр. X), из которых следует, что при добавлении 0,2 мл надосадочнойжидкости, содержащей антиоксидантные ферменты, достоверно снижается расход йода(р < 0,01), свидетельствующий о работе антиоксидантных систем. Эти же данныеговорят о том, что в пробах обоих видов подорожника, обитающих на загрязненныхтерриториях, антиоксидантные системы работают активнее (p < 0,001). Кроме того,у вида с 2n= 24 (P.media) по сравнению с видом с 2n = 12 (P. lanceolata) расход йода в высшейстепени достоверно ниже как в опытных, так и в контрольных вариантах (p < 0,001) (рис. 12).Сказанное свидетельствует о том, что, во-первых, хроническое низкоинтенсивноеγ-облучение, вызывающее образование в цитоплазме пероксидов и свободныхрадикалов, способно активировать антиоксидантные системы у облучаемых растений;во-вторых, у растений с большей плоидностью антиоксидантные ферменты либоактивнее, либо присутствуют в клетках в большем количестве. Представленныеданные доказывают предположения авторов [16], что характеристикиокислительно-восстановительного метаболизма являются основными физиологическимидетерминантами радиорезистентности организмов к длительному низкоинтенсивномувоздействию.
Вопрос о природе повышенной радиоустойчивости хроническиоблучаемых популяций растений остается открытым. Несмотря на то, что действиеповышенного фона радиации, индуцирующего накопление мутационного груза, висследованных районах имеет место уже в течение полувека, специфическогоприспособления к мутагенному действию данного экологического фактора уорганизмов не выработалось. Одним из ведущих механизмов выступает активацияхроническим β- и γ-облучением репарационных систем [3, 17]. На выходиндуцированных мутаций влияют генотипические различия организмов, которыеобязательно имеют место как внутри популяций, так и между популяциями вособенности. Далее, вновь возникающие наследственные изменения в природныхусловиях будут подвергаться естественному отбору, направленному, прежде всегона повышение радиоустойчивости [2, 4, 19, 24]. По мнению ряда авторов [2, 3, 4,19], ионизирующие излучения способны выступать не только мутагенным, но и новымэкологическим фактором, отбирающим радиорезистентные фенотипы и гаметы, содержащиеоптимальные геномы [2, 19]. Кроме того, из полученных нами данных следует, чтоеще одним механизмом радиопротекторного эффекта является активацияантиоксидантных систем, разрушающих продукты радиолиза воды и органическихвеществ. Выяснено, что у растений с большей плоидностью радиопротекторныйэффект выражен существенно ярче, объясняющий более низкий уровень спонтанногомутагенеза у подобных растений (рис. 5, стр. V; рис. 12, стр. X).
Заключение
На основании полученных и проанализированных результатов можносделать следующие выводы:
1. Хроническое облучение втечение 50 лет приводит к достоверному повышению уровня мутационного процесса впопуляциях многолетних растений: Achyrophorus maculatus и Plantago media. В то же время, впопуляциях Plantago lanceolata аналогичный эффект отмечен на уровне тенденции.
2. Радиорезистентностьвысших растений на примере родственных видов подорожника зависит от их плоидности:вид с 24 хромосомами (P. media) оказывается более радиорезистентным по сравнению с видом с 12хромосомами (P.lanceolata).
3. Впервые на высшихрастениях показана повышенная эффективность работы антиоксидантных систем уполиплоидных форм, вероятно, объясняющаяся их большей неспецифической устойчивостью.
4. В обеих популяциях(контрольной и опытной) A. maculatus в вариантах с часовым интервалом между фракциямирадиационный эффект подчиняется принципу аддитивности, в то же время, присуточном интервале между фракциями индуцируется высоко достоверныйрадиопротекторный эффект, особенно ярко проявляющийся в опытной популяции.
5. Радиопротекторные механизмыхронического и предварительного низкоинтенсивного облучения схожи, и основнымииз них являются: а) активация репарационных систем; б) отбор наиболее радиорезистентныхфенотипов и гамет с оптимальным геномом; а также в) активация антиоксидантныхсистем растений, длительное время обитающих в условиях хронического низкоинтенсивногооблучения.
/>/>/>Список использованной литературы
1. Lane J.K… X-ray fractionation and chromosome breakage.//Heredity,v. 5, 1951, p. 1-35.
2. АбрамовВ.И., Кальченко В.А. и др. Цитогенетические эффекты в популяциях растении,произрастающих на Восточно-Уральском радиоактивном следе (ВУРСе).//Международная конференция «Генетические последствия чрезвычайных радиационныхситуаций», М., 10-13 июня 2002 г. М., РУДН, 2002: 5.
3. АбрамовВ.И., Шевченко В.А… Генетические последствия хронического действияионизирующих излучений на популяции.//Радиационный мутагенез и его роль вэволюции и селекции. М., «Наука», 1987: 83.
4. АбрамовВ.И… Влияние хронического облучения на природные популяции растений.Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологическихнаук. М., 1985.
5. АлексахинР.М., Криволуцкий Д.А., Соколов В.Е… Организация научных исследований порадиоэкологии на Восточно-уральском радиоактивном следе. //Экологическиепоследствия радиоактивного загрязнения на Южном Урале. М., «Наука», 1993: 6.
6. АлексеевВ.Н. Количественный анализ. 4-е издание, переработанное, М., «Химия», 1972: 504стр.
7. ГераськинС.А… Цитогенетические последствия облучения растений в низких дозах.//Международная конференция «Генетические последствия чрезвычайных радиационныхситуаций», М., 10-13 июня 2002 г. М., РУДН, 2002: 33.
8. ГилеваЭ.А… Хромосомная нестабильность у грызунов с территории ВУРСа: межвидовыесравнения.// Международная конференция «Генетические последствия чрезвычайныхрадиационных ситуаций», М., 10-13 июня 2002 г. М., РУДН, 2002: 33.
9. КузинА.М… Методология структурно-метаболической теории в радиобиологии: клетка какдинамическая система. М, РУДН, 2004: 56.
10. Куликов Н.В., ТимофееваН.А., Альшиц Л.К. Действие предварительного облучения на последующуюрадиочувствительность предличинок линя (Tinca tinca L.).// Действиеионизирующих излучений на гидробионты и наземные растения. Свердловск, 1970: 3.
11. Ли Д.Э… Действиерадиации на живые клетки. М., Госатомиздат, 1963: 288
12. Митрофанов Ю.А.,Олимпиенко Г.С… Индуцированный мутационный процесс эукариот. М., «Наука»,1980: 264 стр.
13. Новиков В.С., ГубановИ.А… Школьный атлас-определитель высших растений. 2-е издание. М.,«Просвещение», 1991: 239 стр.
14. Плохинский Н.А…Алгоритмы биометрии. М., Изат. МГУ, 1980: 150 стр.
15. Радиационное наследствоСоветского ядерного комплекса, Аналитический обзор, Редакторы: Егоров Н.Н. идр. NASA-EARTHSCAN, Лондон: Earhtscan Publications Ltd, 2000, 236 стр.
16. Расина Л.Н., ОреховаН.А… Окислительно-восстановительный метаболизм как физиологическая детерминантавидовой радиорезистентности мелких млекопитающих на ВУРСе. //Международнаяконференция «Генетические последствия чрезвычайных радиационных ситуаций», М.,10-13 июня 2002 г. М., РУДН, 2002: 97.
17. Раушенбах Ю.О.,Монастырский О.А… Исследование адаптации животных к повышенному естественномуфону радиации.//Влияние ионизирующих излучений на наследственность. М., «Наука»,1966: 165.
18. Рейвн П., Эверт Р.,Айкхорн С., Современная ботаника. В 2 томах. «Мир» 1990.
19. Рубанович А.В…Популяционные исследования растений, животных и человека в зонах радиационныхаварий. Автореферат диссертации на соискание учёной степени доктора биологическихнаук. М., 2006: 64.
20. Серебряный А.М., ЗозН.Н… Стимулированная репопуляция как основа феноменов антимутагенеза и адаптивногоответа у растений//Генетика. 2002. Т. 38. № 3. С.340-346.
21. Тимофеева-Ресовская Е.А.,Тимофеев-Ресовский Н.В… Влияние разных доз γ-лучей 60Со на ряску иэлодею.//Влияние ионизирующих излучений на наследственность. М., «Наука», 1966:253.
22. Турова Н.Я. Справочныетаблицы по неорганической химии. Л., «Химия», 1977: 20.
23. Урбах В.Ю…Биометрические методы. М., «Наука», 1964.
24. Шевченко В.А., АбрамовВ.И., Печкуренков В.Л… Генетические исследования на Восточно-Уральскомрадиоактивном следе.//Экологические последствия радиоактивного загрязнения наЮжном Урале. М., «Наука», 1993: 258.
25. Ярмоненко С.П… ВайсонА.А… Радиобиология человека и животных. М., «Высшая школа», 2004: 543 стр.